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價(jià)格：電議
所在地：北京
型號(hào)：HR0233-50T
手機(jī)：18518407031(微信同步）
電話：18518407031
更新時(shí)間：2023-05-31
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公司地址：北京市海淀區(qū)紫雀路33號(hào)院3號(hào)樓
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王欣(女士) （來(lái)電時(shí)請(qǐng)說(shuō)是從給覽網(wǎng)看到我的)
適用樣本：
● 組織 ● 細(xì)胞
試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 移液器 ● 離心機(jī) ● 振蕩器 ● Dounce勻漿器 ● 渦旋混勻器 ● PBS緩沖液
注意事項(xiàng)：
● 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
● 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。
● 最好使用標(biāo)準(zhǔn)Dounce勻漿器勻漿，如果沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)Dounce勻漿器，用普通1mL玻璃勻漿器勻漿也可，但是線粒體回收率會(huì)下降。
使用方法：
細(xì)胞線粒體提?。?/b>
1、取1-2×107個(gè)細(xì)胞，在4℃，500×g條件下離心2-3 分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞；
2、用冷PBS洗滌兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
【注】：
● 用1000×g力離心5分鐘。
3、細(xì)胞沉淀中加入500μL-1mL冷的試劑A重懸，置冰上5分鐘。
4、用 Dounce勻漿器勻漿30-40下，然后在4℃，500×g條件下離心5分鐘。
【注】：
● 先用Dounce勻漿器的松型槌初步勻漿10-20次，再用緊型槌勻漿20-30次。
● 每上下一個(gè)來(lái)回為一次。
5、將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，棄沉淀。
6、將上清在4℃，1000×g力條件下離心10分鐘。棄沉淀，收集上清。
7、將上清在4℃，11000×g力條件下離心15分鐘。棄上清，收集沉淀。
8、在沉淀中加入400μL冷的試劑B，輕輕混勻。
9、在4℃，11000×g以上條件下離心15分鐘。
10、棄上清，沉淀用線粒體保存液重懸。
【注】：
● 也可不用試劑盒中的線粒體保存液重懸。
● 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的緩沖液重懸線粒體或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
11、即得到線粒體樣品，置冰箱備用或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
組織線粒體提取：
1、取50-100mg新鮮動(dòng)物組織樣本，用PBS洗滌干凈。
2、用手術(shù)剪刀盡可能剪碎，用冷PBS洗滌兩次。
【注】：
● 用1000×g里離心5分鐘。
3、沉淀中加入500μL-1mL冷的試劑A混勻，置冰上5分鐘。
4、用Dounce勻漿器勻漿30-40下，然后在4℃，500×g條件下離心5分鐘。
【注】：
● 先用Dounce勻漿器的松型槌初步勻漿10-20次，再用緊型槌勻漿20-30次。
● 每上下一個(gè)來(lái)回為一次。
5、將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，棄沉淀。
6、將上清在4℃，1000×g力條件下離心10分鐘。棄沉淀，收集上清。
7、將上清在4℃，11000×g力條件下離心15分鐘。棄上清，收集沉淀。
8、在沉淀中加入400μL冷的試劑B，輕輕混勻。
9、在4℃，11000×g以上條件下離心15分鐘。
10、棄上清，沉淀用線粒體保存液重懸。
【注】：
● 也可不用試劑盒中的線粒體保存液重懸。
● 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的緩沖液重懸線粒體或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
11、即得到線粒體樣品，置冰箱備用或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
免責(zé)聲明：以上所展示的[HR0233-50T 動(dòng)物線粒體提取試劑盒]信息由會(huì)員[北京百奧萊博科技有限公司]自行提供，內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由發(fā)布會(huì)員負(fù)責(zé)。
