R01與O2的這種反應(yīng)是非破壞性且完全可逆的,R01無(wú)細(xì)胞毒性,是化學(xué)穩(wěn)定的,惰性的,水溶性的和細(xì)胞不滲透的,不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜。因此還可同時(shí)與糖酵解,線粒體膜電位JC-1,ROS和細(xì)胞ATP、LDH等檢測(cè)的試劑結(jié)合使用,進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)。用R01進(jìn)行細(xì)胞外耗氧檢測(cè)方法及其簡(jiǎn)單,不需要適用特殊的儀器設(shè)備,只需要熒光酶標(biāo)儀之類的熒光讀

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營(yíng)血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國(guó)內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長(zhǎng)期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。 主營(yíng)產(chǎn)品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

產(chǎn)品特點(diǎn)：

● 廣泛適用于各種體外模型；不再局限于單層細(xì)胞,還能測(cè)定懸浮細(xì)胞、微生物和特定的3D培養(yǎng)物；

● 簡(jiǎn)單的“混合-檢測(cè)”方案允許使用多種其他分析試劑盒進(jìn)行多參數(shù)分析；

● 可逆轉(zhuǎn),能夠觀察耗氧量的瞬態(tài)和長(zhǎng)時(shí)間變化；

● 可適配多種熒光酶標(biāo)儀以及標(biāo)準(zhǔn)96孔和384孔；

● 以高通量的形式方便地測(cè)量；

● 無(wú)需等待專用設(shè)備空閑所需的實(shí)驗(yàn)室時(shí)間,也無(wú)需大額資金專用設(shè)備投入。

產(chǎn)品用途：

● 線粒體功能和細(xì)胞代謝研究；

● 測(cè)量活細(xì)胞中的線粒體活性；

● 研究各種處理對(duì)細(xì)胞耗氧量的影響；

● 研究基因修飾對(duì)細(xì)胞耗氧量的影響；

● 研究呼吸和線粒體功能；

● 探究氧含量與細(xì)胞代謝變化之間的聯(lián)系；

● 直接評(píng)估藥物處理的線粒體毒性。

適用樣本類型：

● 細(xì)胞：貼壁細(xì)胞/懸浮細(xì)胞/透化細(xì)胞；

● 分離的線粒體；

● 3D培養(yǎng)物；組織；

● 分離的酶；

● 微生物：細(xì)菌/酵母/霉菌。

熒光檢測(cè)模式：

● 基礎(chǔ)模式：熒光強(qiáng)度測(cè)定；

● 標(biāo)準(zhǔn)模式：時(shí)間分辨熒光測(cè)量（TR-F）；

● 高級(jí)模式：熒光Lifetime calculation（FLIM,Autofluorescence Lifetime Imaging system,Dual-read Ratiometric TR-F measurement）

【注】：

● 以上取決于酶標(biāo)儀的類型和儀器設(shè)置,不是所有儀器可用。

試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：

● 熒光酶標(biāo)儀（須配備相應(yīng)的波長(zhǎng)過(guò)濾器和溫度控制器。時(shí)間分辨熒光功能的讀板機(jī)佳（如果有）） ● 離心機(jī) ● PBS/HBSS（無(wú)酚紅） ● 對(duì)照試劑（選配,非必須）：Glucose Oxidase,Antimycin A,FCCP ● 黑色透明底熒光專用培養(yǎng)板

使用注意事項(xiàng)：

● 螺旋蓋微量管裝試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。

● 細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

● 以下操作以96孔細(xì)胞培養(yǎng)板為例。其他培養(yǎng)容器或裝置請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整試劑用量和檢測(cè)方法。各試劑等比例調(diào)整即可。O₂熒光探針終濃度25倍稀釋最佳。
● R01探針的信號(hào)變化直接取決于所測(cè)量細(xì)胞類型的細(xì)胞呼吸速率,建議盡可能使用每孔高的細(xì)胞密度作為起點(diǎn),并根據(jù)需要減少細(xì)胞數(shù)量。

● 并非所有細(xì)胞類型都消耗足夠用于檢測(cè)的氧氣。

● 必須用熒光培養(yǎng)專用的透明底黑色培養(yǎng)板,減少檢測(cè)時(shí)各孔之間的光互相干擾。

● 用于測(cè)定的所有儀器試劑溶液耗材均需37℃預(yù)熱。

● 添加氧氣封閉液時(shí)注意避免產(chǎn)生氣泡。

● 盡可能使用多通道移液器添加試劑。

● 如果藥物有紅色熒光（如阿霉素等）需要換液,不含培養(yǎng)基和待測(cè)藥物,用HBSS貨PBS體系檢測(cè),在無(wú)血清無(wú)酚紅環(huán)境檢測(cè)。

● 建議設(shè)定FCCP處理的陽(yáng)性對(duì)照樣本。

關(guān)于儀器設(shè)置：

● 溫度對(duì)檢測(cè)有較大影響。有條件的話,務(wù)必使用配有溫度控制的酶標(biāo)儀。

● 常規(guī)的熒光信號(hào)強(qiáng)度測(cè)量,使用基于單色儀或基于過(guò)濾器的酶標(biāo)儀,最佳激發(fā)波長(zhǎng)使用450-460nm,發(fā)射波長(zhǎng)使用586-600nm?？筛鶕?jù)實(shí)際機(jī)器和樣本選擇信號(hào)最強(qiáng)的波長(zhǎng)。

● 具有檢測(cè)增益參數(shù)（PMT,Parameters）的通常設(shè)置為中或高。

● 使用bottom read讀數(shù)和top read讀數(shù)均可,基于不同的細(xì)胞模型,建議在預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)兩種讀數(shù)模式均嘗試下,看哪種的趨勢(shì)更加明顯。

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