全血總蛋白提取試劑盒適用于從各種抗凝或非抗凝全血樣本中提取總蛋白。本試劑盒含有的獨(dú)特配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份，包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。 主營產(chǎn)品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、使用方便，將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘。

2、含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

3、紫外檢測蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。

4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 離心機(jī) ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒

使用注意事項(xiàng)：

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。

● 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。

● 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

● 蛋白酶抑制劑混合物避免反復(fù)凍融。

● 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

● 本試劑盒提取的是全血總蛋白，含所有高豐度的白蛋白等。電泳前可以蛋白稀釋液稀釋至約5μg/μL。

● 電泳加Loading Buffer后水煮時(shí)，蛋白液有時(shí)會(huì)變得非常粘稠，可以用65℃保溫10分鐘代替沸水煮。

● 對(duì)于某些目的蛋白在血清中含量很低的情況，或者目的蛋白與白蛋白分子量相近的情況，可能需要先去除白蛋白，需要根據(jù)情況選擇。白蛋白等去除試劑盒需要自備。

使用方法：

1、提取液制備：

每500μL蛋白提取液中加入2μL蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

【注】：

● 根據(jù)需要處理的樣品數(shù)量準(zhǔn)備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

● 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內(nèi)未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。

● 蛋白樣品用于測定某些細(xì)胞內(nèi)蛋白酶、磷酸酶活性等下游實(shí)驗(yàn)時(shí)，注意根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整抑制劑混合物是否加入。

● 以下步驟中使用的蛋白提取液為此步配制好的含蛋白酶抑制劑的提取液。

2、取300μL全血樣品，加入300μL蛋白提取液，充分混勻后，在4℃條件下振蕩20-40分鐘。

【注】：

● 使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，提取液能輕微晃動(dòng)即可。

● 沒有振蕩條件也可以不振蕩，稍微延長提取液的處理時(shí)間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻即可。

3、在4℃，14000×g條件下離心10分鐘。

4、將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到全血總蛋白。

【注】：

● 一般沉淀只是離心管底部薄薄一層，沒有明顯團(tuán)塊。

● 整個(gè)紅色液體即是全血蛋白上清液。

5、將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

【注】：

● 建議用BCA法進(jìn)行蛋白定量。

● 蛋白樣品-80℃存放一年沒問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細(xì)菌污染。

● 全血樣品蛋白濃度較高，需要稀釋后用于下游實(shí)驗(yàn)。一定要根據(jù)蛋白定量的情況稀釋至合適的濃度再用于電泳等下游實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。

常見問題分析：

● 用什么方法定量蛋白？

建議用BCA法。不適合用Bradford法，因?yàn)樵噭?/span>A中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

● 提取的蛋白具有活性嗎？

本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

● 電泳蛋白煮樣品后成膠狀？

全血蛋白樣品濃度極高，需要稀釋到合適的濃度再進(jìn)行下游檢測。

本頁產(chǎn)品地址：http://m.mingjiewl.com/sell/show-9425267.html