產(chǎn)品簡(jiǎn)介
新產(chǎn)品jetCRISPR?——用于基因編輯的RNP轉(zhuǎn)染試劑
公司簡(jiǎn)介
上海澤邁生物技術(shù)有限公司成立于2005年，是專門從事標(biāo)準(zhǔn)品銷售的生物試劑公司。近年來，公司通過和國(guó)內(nèi)權(quán)威第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)，政府機(jī)關(guān)，大學(xué)和中科院等單位的緊密合作，為用戶提供分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)品和耗材等服務(wù)，將國(guó)際知名品牌的產(chǎn)品和先進(jìn)技術(shù)介紹到國(guó)內(nèi)，為廣大國(guó)內(nèi)科研工作者探索未知世界提供強(qiáng)大支持。公司由一群長(zhǎng)期致力于生物科技發(fā)展及市場(chǎng)行銷箐英所組成，為您提供最完整之生物科技產(chǎn)品的服務(wù)。
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產(chǎn)品說明
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CRISPR/Cas9核酸酶系統(tǒng)，是一個(gè)強(qiáng)大且高特異性的基因編輯工具。CRISPR/Cas9是一個(gè)雙組分系統(tǒng)，由gRNA引導(dǎo)Cas9核酸酶到基因組的特異性靶向序列，從而進(jìn)行基因編輯，如突變、插入或刪除。
jetCRISPR?是一種全新的專門為CRISPR/Cas9設(shè)計(jì)的RNP轉(zhuǎn)染試劑，可帶來更高的CRISPR基因編輯效率，同時(shí)保持佳的細(xì)胞活性和狀態(tài)?？靵碓囋噧?yōu)異的CRISPR/Cas9 RNP轉(zhuǎn)染試劑吧！
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◆ 特別用于Cas9蛋白和gRNA轉(zhuǎn)染
◆ 基因編輯效率高
◆ 細(xì)胞活性高，狀態(tài)好
◆ 快速可靠的基因編輯
◆ 操作簡(jiǎn)便
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基因編輯效率高
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jetCRISPR?專為轉(zhuǎn)染RNP(gRNA和Cas9蛋白復(fù)合物)而開發(fā)，可在多種類型細(xì)胞中進(jìn)行多靶點(diǎn)的Cas9基因編輯。(圖1和圖2)
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圖1: 使用jetCRISPR?，在HeLa細(xì)胞中進(jìn)行基因編輯。
在96孔板中進(jìn)行HeLa細(xì)胞RNP轉(zhuǎn)染，每孔0.3 μl的jetCRISPR?試劑和幾種濃度的Cas9蛋白和HPRT1 SgRNA或陰性對(duì)照。轉(zhuǎn)染48h后，T7消化產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳分析并用BET染色，用G:Box紫外成像儀(Syngene®)進(jìn)行成像。圖像經(jīng)Genesnap軟件(Syngene®)采集，INDEL%使用Genetools軟件(Syngene®)確定。
1: 完整的1083bp片段, 2: 827bp長(zhǎng)片段, 3: 256bp短片段.
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圖2: jetCRISPR?基因編輯效率優(yōu)于同類型產(chǎn)品
在96孔板培養(yǎng)的A549和HEK-293細(xì)胞中轉(zhuǎn)染RNP，每孔0.3 μl的jetCRISPR?或Lipofectamine® CRISPRMAX?，30 nM RNP(Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA)。轉(zhuǎn)染48h后，采用T7核酸內(nèi)切酶方法計(jì)算INDEL%，評(píng)估基因編輯效率，INDEL%使用Genetools軟件(Syngene®)確定。
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佳的細(xì)胞活性
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Polyplus的轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞其柔和，細(xì)胞因此能在整個(gè)轉(zhuǎn)染過程中保持佳的活性和狀態(tài)。jetCRISPR?兼容血清和抗生素，因此RNP轉(zhuǎn)染可在利于細(xì)胞活性的優(yōu)化培養(yǎng)條件下進(jìn)行。
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圖3: jetCRISPR?轉(zhuǎn)染48h后，佳的細(xì)胞活性和狀態(tài)
在96孔板中用30nm RNP(Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA)和0.3 μl的jetCRISPR?轉(zhuǎn)染HEK-293和A549細(xì)胞，轉(zhuǎn)染48h后，使用phase contrast ZOE Fluorescent Cell Imager (BIORAD®)觀察細(xì)胞狀態(tài)。
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快速可靠的基因編輯
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轉(zhuǎn)染Cas9蛋白比轉(zhuǎn)染質(zhì)粒， 可以更快的進(jìn)行基因編輯。使用jetCRISPR?轉(zhuǎn)染Cas9蛋白和gRNA可進(jìn)行快速可靠的基因編輯(圖4)。此外，Cas9蛋白可以比質(zhì)粒更快從細(xì)胞中被清除，從而減少了脫靶效應(yīng)，可以更特異的進(jìn)行基因編輯 (Kim S, et al; Genome Research 2014; 24:1012–1019)。
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圖4: 在HEK-293細(xì)胞中，使用jetCRISPR?進(jìn)行快速可靠的基因編輯
在HEK-293細(xì)胞中進(jìn)行RNP轉(zhuǎn)染，96孔板每孔30nM RNP(Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA)和0.3 μl的jetCRISPR?或0.3 μl的Lipofectamine® CRISPRMAX?。轉(zhuǎn)染48h后，采用T7核酸內(nèi)切酶方法計(jì)算INDEL%，評(píng)估基因編輯效率，INDEL%使用Genetools軟件(Syngene®)確定。
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操作簡(jiǎn)便
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jetCRISPR?為即用型溶液。RNP轉(zhuǎn)染過程簡(jiǎn)便：RNP復(fù)合體形成、加入轉(zhuǎn)染試劑、再加到孔中。jetCRISPR?適用于正向轉(zhuǎn)染和反向轉(zhuǎn)染，因此可以很方便的根據(jù)細(xì)胞調(diào)整實(shí)驗(yàn)操作，以獲得效果。使用反向轉(zhuǎn)染操作比正向轉(zhuǎn)染提前一天獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖5)。
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圖5: jetCRISPR?正向轉(zhuǎn)染和反向轉(zhuǎn)染操作步驟
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產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品名稱
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貨號(hào)
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試劑規(guī)格
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jetCRISPR?
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PT-502-01
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0.1 mL
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PT-502-07
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0.75 mL
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PT-502-15
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1.5 mL
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應(yīng)用
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gRNA和Cas9成功進(jìn)入目標(biāo)細(xì)胞，是基因編輯必不可少的部分。然而，使用無DNA的方案，即Cas9以蛋白/gRNA復(fù)合物方式導(dǎo)入細(xì)胞，更有吸引力。因?yàn)樗朔薉NA入核的主要屏障，同時(shí)避免不必要的DNA整合。此外，導(dǎo)入Cas9蛋白更容易調(diào)控Cas9的表達(dá)，從而減少了Cas9核酸酶的脫靶活性。這是為什么科學(xué)家們需要可靠的轉(zhuǎn)染試劑，來實(shí)現(xiàn)這個(gè)應(yīng)用。
我們?yōu)镃RISPR實(shí)驗(yàn)提供了全套解決方案 (表1和圖6):
?jetCRISPR?轉(zhuǎn)染RNP –蛋白和gRNA共轉(zhuǎn)染
?jePRIME®用于CRISPR DNA質(zhì)粒方案
?jetMESSENGER?用于RNA轉(zhuǎn)染(gRNA和mRNA共轉(zhuǎn)染)
?in vivo-jetPEI®用于DNA活體轉(zhuǎn)染(Zuckermann et al. (2015) Nat Commun6, 7391; He et al. (2016) PLoSPathog 12. E1005743)
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表1:專為CRISPR實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)染試劑
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圖6：為CRISPR實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的體外轉(zhuǎn)染試劑
本頁產(chǎn)品地址：http://m.mingjiewl.com/sell/show-7782526.html
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