產(chǎn)品名稱：人血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒
英文名稱： human ANG-R-Tie2 ELISA kit
規(guī)    格：48T/96T，可以提供定量和定性。
本試劑盒僅供科研實驗使用！

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人ANG-R-Tie2抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人ANG-R-Tie2與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ANG-R-Tie2抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素?？谷薃NG-R-Tie2抗體與結合在包被抗體上的人ANG-R-Tie2結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，人ANG-R-Tie2濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中人ANG-R-Tie2的濃度。

試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（8μg/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
4μg/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
2μg/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
1μg/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
0.5μg/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
0.25μg/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后15 鐘以內進行。