產品簡介:
植物組織或果實中存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質,這些物質與果實等樣品衰老過程密切相關,對其加工性能、存儲、營養(yǎng)價值等都有重要影響,植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用而廣泛應用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領域。
植物總酚檢測試劑盒(微板法)檢測原理是總酚(Total Phenol)溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提總酚,根據提取液的吸收光譜特性,可利用分光光度計在特定波長(280nm)處測定其吸光度,通過與標準曲線比較,計算出總酚含量,主要用于植物組織或果實中總酚的提取以及定量檢測總酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
保質期:12個月有效;常溫運輸,4℃保存。
產品組成:
名稱 編號 R32067 100T Storage
試劑(A): 總酚標準(1mg/ml) 1.5ml 4℃ 避光
試劑(B): TP Assay Buffer 2×500ml RT
使用說明書 1份
自備材料:
1、實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織
2、研缽或勻漿器
3、離心管、離心機
4、濾紙或紗布
5、96 孔板
6、酶標儀
操作步驟(僅供參考):
1、總酚提?。?br />
①取果實或其他植物組織,洗凈,擦干,稱取剪碎的新鮮樣品 0.25g,置于4℃預冷的研缽或勻漿器。
②加入4℃預冷的2~3ml TP Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉入10ml離心管,用TP Assay Buffer 沖洗研缽或勻漿器并轉移至離心管,補加TP Assay Buffer至8ml。
③4℃避光靜置20min,期間搖動 2~3 次,然后過濾至離心管,也可用離心機8000r/min離心 3min,濾液(上清液)即為總酚粗提液。
2、稀釋總酚標準溶液:取適量的總酚標準(1mg/ml),按下表進行稀釋:
加入物(μl) 1 2 3 4 5 6
總酚標準(1mg/ml) 30 60 90 120 150 300
蒸餾水 270 240 210 180 150 0
總酚濃度(mg/ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 1
3、 TP 加樣:取 96 孔板,按照下表設置空白孔、對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加
入,并注意避免產生氣泡,小心混勻;如果樣品中的總酚濃度過高,可以減少樣品用量
或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測好能設置 2 平行孔,求平均值。
加入物(μl) 空白孔 標準孔 測定孔
TP Assay Buffer 200 - -
系列總酚標準(1~6 號孔) - 200 -
總酚粗提液 - - 200
4、TP 測定:以空白調零,以酶標儀測定系列標準孔、測定孔在 280nm 處吸光度。
計算:
以 1~6 號孔系列總酚標準濃度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)為橫坐標,以對
應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,進而計算出各測定孔總酚含量(mg/ml)。
組織樣品的總酚(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中:C=根據標準曲線求得的測定管總酚含量(mg/ml)
VT=總酚粗提液總體積(ml)=8
V1=加樣時所用總酚粗提液的體積(ml)=0.2
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的總酚(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據標準曲線求得的測定管總酚含量(mg/ml)
V=加樣時所用總酚粗提液的體積(ml)=0.2
N=稀釋倍數
注意事項:
1、為了避免總酚見光分解,操作時應盡量避光,研磨或勻漿時應盡量縮短時間。
2、取樣量、試劑用量應根據總酚含量適當調整。
3、TP Assay Buffer 應密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。
4、如果沒有酶標儀,也可以使用分光光度計測定。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。





