肌肉組織活檢及相應的特殊染色,可以顯示肌纖維的結(jié)構、類型及化學成分變化,幫助診斷各種類型的肌纖維疾病,肌肉組織活檢技術不但可以對已發(fā)現(xiàn)的肌病有明確深入的認識,還可以發(fā)現(xiàn)一些新的肌病,使骨骼肌肉病的診斷提高到形態(tài)和功能相結(jié)合的新水平。骨骼肌組織活檢宜采用低溫急速冷凍切片的方法來進行染色觀察,目的是為了真實的反應肌纖維各種形態(tài)和結(jié)構的變化,避免因固定、脫水、包埋和熱處理等過程造成的人為假象和酶活性的喪失,并且使肌肉組織保存原有結(jié)構不被破壞。
Gomori三色染色是在Masson三色染色法基礎上改良而來的結(jié)締組織多色染色法,可使結(jié)締組織中的多種成分著色,肌纖維呈青綠色,膠原纖維呈亮綠色,細胞核呈紫色,線粒體呈紅色,背景為綠色,顯色清晰,便于觀察。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、蒸餾水
2、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
1、新鮮肌肉組織取材后立即進行冰凍切片,切片厚度為10~15um。
2、用配制好的Weigert鐵蘇木素染色5~10min。
3、流水沖洗5~10min,鏡下觀察;如果染色過深,可用酸性乙醇分化液分化數(shù)秒。
4、水洗返藍,蒸餾水洗2~4次。
5、入Gomori染色液染色20~40min。流水沖洗。
6、在上述操作過程中按蒸餾水:Gomori分化液=4:1比例配制Gomori分化工作液。
7、用Gomori分化工作液洗30s-90s,以鏡下觀察適當為宜。流水沖洗。
8、95%乙醇快速脫水,無水乙醇脫水3次,每次5~10s。
9、二甲苯或脫蠟透明液透明3次,每次1~2min,中性樹膠封固。
產(chǎn)品組成:
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名稱 編號 |
4×50ml |
4×100ml |
Storage | |
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試劑(A)Weigert 鐵蘇木素染色液 |
A1:Weigert染液A | 25ml | 50ml | RT避光 |
| A2:Weigert染液B | 25ml | 50ml | RT避光 | |
| 臨用前,取A1、A2等量混合即為Weigert鐵蘇木素染色液,不宜提前配制。 | ||||
| 試劑(B):酸性乙醇分化液 | 50ml | 100ml |
RT |
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| 試劑(C):Gomori染色液 | 50ml | 100ml |
4℃避光 |
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| 試劑(D):Gomori分化液 | 50ml | 100ml |
RT |
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| 使用說明書 |
1份 |
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