名稱：ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

產(chǎn)品規(guī)格：500ml/100ml

分類：細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件:4℃,12個(gè)月

用途:復(fù)蘇電轉(zhuǎn)化或化學(xué)轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,提高轉(zhuǎn)化效率。

注意事項(xiàng): 注意事項(xiàng):無(wú)菌溶液。注意無(wú)菌操作,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。

主要成分：主要由NH4Cl組成，pH7.2。

使用范圍：僅限科研使用，不能應(yīng)用于臨床。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

去除紅細(xì)胞的方法有多種，Leagene生產(chǎn)的ACK紅細(xì)胞裂解液(Red?Blood?Cell?Lysis Buffer)，也稱為ACK?Lysis?Buffer，是一種從人、鼠或其他哺乳動(dòng)物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無(wú)核紅細(xì)胞的溶液，其主要有效成分為氯化銨，ACK?Lysis?Buffer經(jīng)過(guò)優(yōu)化配方，在裂解無(wú)核紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。

Leagene?ACK?Lysis?Buffer對(duì)于裂解、去除有細(xì)胞核紅細(xì)胞，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞，效果不佳，裂解類似細(xì)胞時(shí)，不建議采用。本裂解液經(jīng)過(guò)濾除菌，經(jīng)過(guò)ACK?Lysis?Buffer處理過(guò)的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。

自備材料：

1、 胰蛋白酶,亦可采購(gòu)Leagene的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)(CC0130)

2、 離心機(jī)

3、 PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液

操作步驟:

(一)組織細(xì)胞樣本的常規(guī)操作

1、制備細(xì)胞懸液: 新鮮組織經(jīng)過(guò)胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過(guò)適當(dāng)方法制制備成細(xì)胞懸液,離心棄上清。

2、裂解: 加入3～5倍細(xì)胞沉淀體積的ACK?Lysis?Buffer,輕柔吹打混勻,裂解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。

3、離心:?4℃,400～500g離心5min,棄紅色上清。如無(wú)低溫離心機(jī)本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌:根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,400～500g離心2～3min,棄上清,離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。

6、如有必要,重復(fù)上述步驟5一次,共洗滌1～2次。

7、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀,進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。