人ELISA試劑盒實驗方法與步驟
(1)環(huán)磷酰胺處理:取骨髓前24h先給小鼠腹腔注入環(huán)磷酰胺,注射劑量為100mg/kg動物體重。
(2)取骨髓:用損傷脊髓法處死小鼠,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出大腿骨,用一小塊紗布來回搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關節(jié)頭,然后用注射器吸取5ml鹽水,插入股骨一端,將骨髓細胞沖洗至10ml的離心管中。可重復沖洗多次,直至骨髓腔呈白色為止。
(3)離心處理:將所獲得的細胞懸浮液以 1000rpm離心10min,吸去上清液,在沉淀物中加入2滴滅活的小牛血清,制成細胞懸液。
(4)涂片:滴一滴懸液于載玻片一端,按常規(guī)方法涂片,在空氣中晾干。
(5)固定:將晾干的載玻片放入甲醇固定液中10min,取出晾干。
(6)染色:將制片平放在玻璃板上,用1∶9∶10的 Giemsa∶PBS∶瑞氏染液,染色15min,流水沖洗后晾干即可鏡檢。
(7)觀察:嗜多染紅細胞為年幼紅細胞,呈灰藍色,略大于紅細胞(紅色),微核多呈圓形和橢圓形,呈藍紫色或紫紅色。
樣本處理的具體方法
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-D ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-C ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-B ELISA Kit
小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit
小鼠血管緊張素轉化酶2(ACE2)ELISA試劑盒 ,英文名: ACE2 ELISA Kit
小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒 ,英文名: ACE ELISA Kit
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 ,英文名: aGT ELISA Kit
小鼠血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒 ,英文名: AT2R ELISA Kit
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: ANG-Ⅱ ELISA Kit
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 ,英文名: Ang-Ⅰ ELISA Kit
小鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒 ,英文名: Ang1-7 ELISA Kit
小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒 ,英文名: VIP ELISA Kit
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒 ,英文名: BrdU ELISA Kit
小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒 ,英文名: ASD ELISA Kit






