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人急性淋巴性白血病 ；RS4;11細(xì)胞，上海細(xì)胞庫(kù)熱賣細(xì)胞：DC2.4細(xì)胞、MC38細(xì)胞、SP2/0細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、bEnd.3細(xì)胞等。熱賣血清：SERANA胎牛血清、BOVOGEN胎牛血清、SV30087.02、sh30396.03、10270-106、10099-141等。熱賣國(guó)外品牌試劑：Transgenomic突變檢測(cè)試劑盒706025、706020、????Stratec糞便DNA提取試劑盒1038111100?、1038111200?等 santa、abcam、cst抗體訂購(gòu)??！

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HL-60	人髓系白血病	懸浮
HOS	人骨肉瘤	貼壁
HPA-V	人前脂肪細(xì)胞系	貼壁
Hs-578T	人乳腺癌細(xì)胞	貼壁
HT-29	人結(jié)腸腺癌	貼壁
HTC0903	大鼠肝癌	貼壁
HuH-7 Liver	人肝癌細(xì)胞
Hut-102	人小細(xì)胞肺癌	貼壁
Hut-78	人T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞	懸浮
HUVEC	人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	貼壁
Ishikawa(ISK)	子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞	貼壁
J774A.1	小鼠單核巨噬細(xì)胞	貼壁
Jurkat	T淋巴細(xì)胞白血病	懸浮
K-562	慢性髓原白血病	懸浮
KEL	人子宮內(nèi)膜癌	貼壁
L-02	人胎肝（國(guó)產(chǎn)）	貼壁
Lewis	小鼠肺癌瘤株	貼壁
LNCaP	人前列腺癌（AR+）	貼壁
LS174T	人結(jié)腸癌細(xì)胞	貼壁
M17	人神經(jīng)母細(xì)胞瘤	貼壁
MC3T3-E1	小鼠成纖維細(xì)胞（小鼠胚胎后期成骨細(xì)胞）	貼壁
MCF-7	人乳腺癌（ER+）	貼壁
MCF-7/阿霉素200ng/ml	人乳腺癌（ER+）	貼壁
MDA-MB-231	人乳腺癌（ER-）	貼壁
MDA-MB-231 Breast	人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-435	人乳腺癌（HER2+）	貼壁
MDA-MB-453 Breast	人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-468	人乳腺癌細(xì)胞	貼壁

人急性淋巴性白血病 ；RS4;11細(xì)胞細(xì)胞凋亡從線蟲(chóng)到人類都高度保守，當(dāng)細(xì)胞接收到凋亡信號(hào)后，通過(guò)一系列精細(xì)調(diào)控和傳遞后，下游的凋亡執(zhí)行者caspase家族蛋白（CED-3是其中一員）被激活從而誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生。施一公教授領(lǐng)導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)室十五年來(lái)一直致力于對(duì)細(xì)胞凋亡調(diào)控機(jī)理的研究。但是這條通路上caspase蛋白被激活的具體機(jī)制至今仍不清晰。2010年施一公實(shí)驗(yàn)室解析了CED-4細(xì)胞凋亡小體八聚體的晶體結(jié)構(gòu)，是對(duì)CED-4介導(dǎo)的CED-3激活機(jī)制研究的重要突破，但是CED-3與CED-4的相互作用界面及機(jī)制仍然有待揭示。

人急性淋巴性白血病 ；RS4;11細(xì)胞，血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種生長(zhǎng)因子及其它營(yíng)養(yǎng)成分。常見(jiàn)問(wèn)題解答：

1、有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)"，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量!

2、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。

如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng);

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);

(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。

3、 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。

(3) 培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2。

(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。

(5) 掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。

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本人做銷售6年多了，已經(jīng)賣了將近3萬(wàn)多瓶的血清了，囊括：Gibco胎牛血清、Hyclone胎牛血清、德國(guó)SERANA胎牛血清、活性炭處理血清、超低IgG血清、透析胎牛血清、熱滅活血清等，有很多老師收到血清使用時(shí)發(fā)現(xiàn)有沉淀想象，像頭皮屑有的甚者在纖維鏡下看到像成團(tuán)棉花一樣，因此懷疑產(chǎn)品的質(zhì)量問(wèn)題，其實(shí)這是沒(méi)有根據(jù)的。它是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清，大多來(lái)自北方，由于價(jià)格低廉，保存環(huán)境都不好，從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融，每次凍融過(guò)程，就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”，很少有沉淀產(chǎn)生。而進(jìn)口的胎牛血清，過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著時(shí)間的推移，血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。當(dāng)然，進(jìn)口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁，甚至有大量沉淀。當(dāng)然，購(gòu)買回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài)，使用時(shí)需要融化，融化過(guò)程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行，否則沉淀相對(duì)較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量，但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。那如何去除這些絮狀沉淀呢，我司王技術(shù)總結(jié)歸納了血清沉淀融化“三步曲”，希望能幫到您。

一步：室溫90min或者15-20°C水浴18min。

第二步：20°C水浴25min。

第三步：37°C水浴35min。

如果內(nèi)有頭皮屑絮狀沉淀，說(shuō)明脂蛋白和纖連蛋白析出，不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)。

假設(shè)細(xì)胞培養(yǎng)每代傳代時(shí)間超過(guò)正常傳代時(shí)間，有可能細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中受到了污染或致電技術(shù)咨詢。

關(guān)鍵詞：胎牛血清；進(jìn)口胎牛血清；沉淀；析出；細(xì)胞污染；絮狀
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