鳥ＥＬＩＳＡ試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。往預(yù)先包被鳥超氧化物歧化酶捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鳥超氧化物歧化酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度，計(jì)算樣品濃度。鳥ＥＬＩＳＡ試劑盒試驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)如下：
1、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
2、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
3、在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
4、不能使用過期產(chǎn)品。
5、如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
6、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25。使用后立即冷藏保存試劑。
7、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
8、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
9、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
10、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。