ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。ELISA檢測類型主要的有四種，直接法、間接法、夾心法和競爭法。

1、ELISA直接法

在ELISA直接法中，樣品中的抗原或抗體以非特異性方式直接吸附在包被板上。然后，將特異性測定抗體或抗原連接到孔中。之后，測定底物被用來產(chǎn)生可測量的顏色變化，并在讀板器上進(jìn)行量化。

由于這種檢測方法步驟少，速度快，而且比其他ELISA方法少有機(jī)會引入錯誤。然而，由于吸附步驟是非特異性的，背景噪音可能很高。沒有二級抗體步驟意味著沒有信號放大，降低了檢測靈敏度。它還需要為每個所需目標(biāo)創(chuàng)建共軛測定抗體/抗原。

2、ELISA間接法

ELISA間接法，或稱iELISA，初于1978年開發(fā)，用于檢測人血清白蛋白，其工作方式與ELISA直接法非常相似，只是增加了一個二級抗體步驟。這使得測試信號得到放大，克服了ELISA直接法的局限性。

它還否定了對目標(biāo)特異性共軛測定抗體/抗原的需要，因為共軛的二級抗體只需要對一級抗體具有物種特異性。如果總的樣品抗原被結(jié)合到包被板上，就像ELISA直接法一樣，背景噪音仍然是一個問題。

然而，如果該檢測方法用于檢測樣品抗體，純化的目標(biāo)抗原被涂在板上，而一級抗體來自于樣品。這大大減少了背景噪音，因此這些檢測方法在確定樣品中的抗體滴度時受歡迎。

ELISA間接法的缺點包括方案時間較長，有多出錯機(jī)會，以及可能與二級抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

3、ELISA夾心法

顧名思義，ELISA夾心法將抗原夾在抗體之間，該技術(shù)開發(fā)于1977年，可以采用ELISA直接或間接法的形式（上面描述的ELISA夾心法是基于ELISA間接法），除了抗原與檢測板的非特異性結(jié)合，捕獲抗體使其成為一個特異性的過程。這種組合進(jìn)一步提高了檢測的靈敏度和特異性。

然而，它們確實需要確定兼容的捕獲和測定抗體對才能有效地發(fā)揮作用，而且可能有交叉反應(yīng)的問題。這種檢測方法通常也有多的步驟，提供了大的出錯機(jī)會。由于抗原結(jié)合步驟的選擇性，ELISA夾心法在抗原處于復(fù)雜混合狀態(tài)時特別有用，因為不需要純化抗原。

4、ELISA競爭法

ELISA競爭法，也被稱為ELISA抑制法或ELISA阻斷法，可能是ELISA技術(shù)中復(fù)雜的一種。

初是在1976年為檢測人類絨毛膜促性腺激素而開發(fā)的，該檢測方法通過檢測對預(yù)期輸出信號水平的干擾，產(chǎn)生一個反比關(guān)系。應(yīng)用的樣品中目標(biāo)物越多，測定的輸出信號就越低。

其他ELISA方法也可以被改變?yōu)楦偁幏ā＿@里有兩個一般的原則：樣品抗原或抗體與參照物競爭，分別與有限數(shù)量的標(biāo)記抗體或抗原結(jié)合；又或者，樣品抗原或抗體可以與標(biāo)記參照物競爭，分別與有限數(shù)量的抗體或抗原結(jié)合。

ELISA競爭法與它所采用的形式一樣，具有一些相同的優(yōu)點和缺點。然而，當(dāng)抗原較小，限制了兩個抗體同時結(jié)合的能力（如ELISA夾心法所要求的），或者只有一個抗體可用時，它的作用就凸顯了出來。