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非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測結果的判定

發(fā)布時間:2019-04-23瀏覽次數(shù):24107返回列表

    非洲豬瘟(ASF)病由非洲豬瘟病毒(ASFV)引起。 ASFV感染家豬、疣豬和南非野豬。該病通過健康和患病動物之間的直接接觸,或通過受感染的飼料間接接觸,以及通過生物載體(軟蜱)進行傳播。ASF的發(fā)病有特急性、急性、亞急性和慢性的形式。由于豬感染的病毒的毒力不同,死亡率從0%到100%不等。
    非洲豬瘟檢測屬于重大疫病檢測,要求儀器具有優(yōu)異的性能,無論是強陽性樣品還是弱陽性樣品,都需要的篩查到。應對非洲豬瘟疫情,熒光定量PCR檢測必不可少。
    非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測結果的判定:
    1、結果分析條件設定
    實時熒光PCR檢測閾值設定原則:閾值線超過陰性對照擴增曲線的高點,且相交于陽性對照擴增曲線進入指數(shù)增長期的拐點,或根據(jù)儀器噪聲情況進行調整。每個樣品反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)即為Ct值。
    2、結果描述及判定
    當陽性對照Ct值≤28.0且出現(xiàn)典型擴增曲線,陰性對照無Ct值無擴增曲線時,實驗成立,實例參考附錄E。當被檢樣品出現(xiàn)典型的擴增曲線且Ct值≤38.0時,判為非洲豬瘟病毒核酸陽性;被檢樣品無Ct值,判為非洲豬瘟病毒核酸陰性;對于Ct值>38.0的樣品且出現(xiàn)典型的擴增曲線,應重檢,重檢仍出現(xiàn)上述結果的判為陽性,否則判為陰性。



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