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新聞中心

使用反相色譜柱須掌握的要點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間:2018-04-09瀏覽次數(shù):2883返回列表

    1、色譜柱的平衡
    反相色譜柱由工廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請(qǐng)一定確保您分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。 每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問題方面獲得大的”補(bǔ)償”,而且您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)!操作步驟:
    平衡開始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑流速如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來平衡)
    如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水”過渡”即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡; 分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
    2、色譜柱的再生
    長(zhǎng)期使用的色譜柱,往往柱效會(huì)下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫?duì)色譜柱進(jìn)行再生,在有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生。
    3、色譜柱的維護(hù)
    使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度);
    大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍;
    避免流動(dòng)相組成及性的劇烈變化;
    流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理;
    如果使用性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中;
    氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

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