ELISA試驗(yàn)中如何防止產(chǎn)生氣泡

  ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周?chē)瑢?dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。在做實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡。

  實(shí)驗(yàn)過(guò)程產(chǎn)生氣泡原因及后果：

  1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周?chē)?，?dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸。

  2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。

  3.包被時(shí)有氣泡的話(huà)，將導(dǎo)致包被不完全實(shí)際包被量下降,實(shí)驗(yàn)結(jié)果弱陽(yáng)性甚至假陰性。

  4.封閉時(shí)有氣泡的話(huà)，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合，實(shí)驗(yàn)結(jié)果本底增高，假陽(yáng)性。

  5.加樣時(shí)有氣泡的話(huà)，抗原抗體不能有效結(jié)合，實(shí)驗(yàn)結(jié)果弱陽(yáng)性甚至假陰性。

  6.加二抗時(shí)有氣泡的話(huà)，抗原抗體不能有效結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果弱陽(yáng)性甚至假陰性(競(jìng)爭(zhēng)法相反。實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽(yáng)性)。

  7.加顯色液時(shí)有氣泡的話(huà)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色不完全。

  8.加終止液時(shí)有氣泡的話(huà)(1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色，OD值增高)

  9.洗滌時(shí)有氣泡的話(huà)，非特異性結(jié)合物不能完全洗去，做無(wú)用功。

  一般氣泡都是集合在酶標(biāo)板的孔周?chē)?，?dǎo)致孔中液體不能與孔壁有用觸摸，使孔內(nèi)反響不均一。

  包被時(shí)有氣泡的話(huà)，將導(dǎo)致包被不徹底實(shí)踐包被量下降--弱陽(yáng)性乃至假陰性。

  關(guān)閉時(shí)有氣泡的話(huà)，將導(dǎo)致很多未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合--本底增高，假陽(yáng)性。

  加樣時(shí)有氣泡的話(huà)，抗原抗體不能有用的結(jié)合--弱陽(yáng)性乃至假陰性。

  加二抗時(shí)有氣泡的話(huà)，抗原抗體不能有用的結(jié)合--弱陽(yáng)性乃至假陰性(競(jìng)爭(zhēng)法相反----假陽(yáng)性)。

  加顯色液時(shí)有氣泡的話(huà)---顯色不徹底。

  加停止液時(shí)有氣泡的話(huà)，1。不能徹底停止反響 2。影響酶標(biāo)儀比色，OD值增高

  洗刷時(shí)有氣泡的話(huà)，非特異性結(jié)合物不能徹底洗去，做無(wú)用功。

  防止辦法：

  1。加樣時(shí)盡量接近孔底(不要觸摸孔底)，用力均勻，不要過(guò)快過(guò)猛。

  2。關(guān)閉時(shí)一定要加滿(mǎn)孔，

  3。洗刷時(shí)一定要加滿(mǎn)孔(重要)，氣泡會(huì)浮上來(lái)zui終驅(qū)除。手藝洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。

  上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專(zhuān)門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿(mǎn)足客戶(hù)的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶(hù)需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶(hù)滿(mǎn)意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。古朵試劑盒