ELISA實(shí)驗(yàn)中突發(fā)問(wèn)題與相應(yīng)的解決辦法

  ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒) (以下簡(jiǎn)稱ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)) ：是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯y(tǒng)i烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測(cè)大分子抗原，后者用于測(cè)定特異抗體。

  ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)可能遇到的問(wèn)題：

  1、過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))。

  2、手工操作中，加樣板過(guò)多形成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間。

  3、加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。.血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣。

  ELISA試劑盒的相應(yīng)解決辦法：

  標(biāo)本為血清：zui好將血液先天然寄存1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘，

  標(biāo)本為血漿：有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管，采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘，若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要儲(chǔ)存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

  1、加樣后及時(shí)放入孵箱。

  2、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

  3、如果選用AT或其他全自動(dòng)加樣，zui好挑選FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

  4、標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。

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