標簽：人ELISA試劑盒 古朵生物 血小板堿性蛋白 酶聯(lián)免疫試劑盒

  人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒說明書

  人血小板堿性蛋白組成:

  1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶

  2 酶標試劑6ml×1 瓶8 標準品(32μg/L) 0.5ml×1 瓶

  3 酶標包被板12 孔×8 條9 標準品稀釋液1.5ml×1 瓶

  4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份

  5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張

  6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個

  標本要求

  1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

  2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步驟

  1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

  16μg/L 5 號標準品150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

  8μg/L 4 號標準品150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

  4μg/L 3 號標準品150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

  2μg/L 2 號標準品150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

  1.0μg/L 1 號標準品150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

  2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

  3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

  4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

  5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次，拍干。

  6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

  7. 溫育：操作同3。

  8. 洗滌：操作同5。

  9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

  15 分鐘.

  10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

  11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。

  操作程序總結(jié)：

  計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

  注意事項

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

  用完，板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

  3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

  4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔*孔的OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

  8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

  保存條件及有效期

  1.試劑盒保存：;2-8℃。

  2.有效期：6 個月