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實驗應該選擇原代細胞還是細胞株?區(qū)別在哪?

發(fā)布時間:2021-06-01瀏覽次數:1151返回列表

  原代細胞(primary cell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞,稱為原代細胞。

  細胞系(cell line)是原代細胞經shou次傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續(xù)傳代的細胞叫做連續(xù)細胞系或無限細胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。



  大多數細胞系已經經過了數十年的培養(yǎng),雖然它們還能很好的適應二維培養(yǎng)環(huán)境,但這些細胞系通常在遺傳學和表型上與其起源組織起源細胞不同,甚至形態(tài)有改變。

  然而,原代細胞不存在這些問題,他們通常是直接從組織中分離的、具有有限壽命和有限增值能力的細胞,因此原代細胞擁有正常細胞的形態(tài),并且能夠體現出該細胞在生物體內所應該具備的標記和功能。例如內皮細胞系常缺乏各種功能性標志蛋白的表達,而原代內皮細胞具有這些關鍵特征。

  與細胞系相反,原代細胞是非常敏感的細胞,需要傳統培養(yǎng)基之外的額外營養(yǎng)物質。為了優(yōu)化原代細胞的存活和生長,需要針對每種細胞類型選擇特定的培養(yǎng)基。例如,內皮細胞對營養(yǎng)的需求與上皮細胞或神經元有很大區(qū)別,因此需要特制的內皮細胞培養(yǎng)基。

  而傳統的細胞培養(yǎng)基依靠血清提供生長因子、激素、脂質和其他的未知組分,以支持細胞的生長。但對于原代細胞,高血清水平可導致細胞分化,或促進污染細胞如成纖維細胞的生長。

  此外,添加血清也受到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培養(yǎng)基則可以避免這些問題,并且geng加有利于促進特定類型原代細胞的生長。而且,其他一些實踐,例如在geng多的生理學相關底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物,可以顯著的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。

  盡管原代細胞可能geng難培養(yǎng),但是使用原代細胞而獲得的數據具有geng好的相關性,并且geng能反映體內環(huán)境。

  原代細胞:從體內直接分離的細胞。功能、代謝、形態(tài)類似體內細胞的特點,因此原代細胞適用于分析單個細胞形態(tài)、代謝、功能。原代細胞的缺點是:細胞均一性差,因為從特定組織取下來的原代細胞可能處于不同的發(fā)育時期。增殖能力差、培養(yǎng)時間受限、轉染效率低。

  細胞株:原代細胞經過長期培養(yǎng)和篩選后,功能、代謝、形態(tài)趨于均一化的無限增殖細胞。適用于整體水平實驗。優(yōu)點是:容易培養(yǎng)、好感染、干擾因素少、便于同步化、實驗好操作。缺點是:與整體差別大、可能喪失原代細胞的特性,細胞株在長期傳代過程中遺傳物質發(fā)生變異。所以同一個學名的細胞株,有可能有完全不同的形態(tài)、代謝、功能表現。不同代數的細胞株,性質也可能完全不同。




  原代細胞由于轉染效率低這個問題,應用受到了限制。自從腺病毒誕生后,因為其超強的感染能力,克服了原代細胞難感染的問題,使得原代細胞的使用變得geng加簡單。由于細胞實驗后,很多時候需要做到動物體內,由于原代細胞有體內細胞的特點,為了細胞實驗和動物體內實驗的結果geng加趨向一致性,因此用原代細胞來進行細胞實驗geng值得考

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