細(xì)菌RNA提取試劑盒是高品質(zhì)的RNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科學(xué)研究，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要細(xì)菌RNA提取試劑盒等RNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括細(xì)菌RNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：細(xì)菌RNA提取試劑盒
英文名稱：Bacterial total RNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：ALH027
產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

本試劑盒適用于快速提取細(xì)菌總RNA。采用獨(dú)特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，然后用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜， 再通過(guò)一系列快速的漂洗－離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物，蛋白等雜質(zhì)去除， zuì后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

試劑盒特點(diǎn)：
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異小，可重復(fù)性好?？朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,lǜ仿等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
3.快速，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。
4.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9～2.0，基本無(wú)DNA殘留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各種實(shí)驗(yàn)。

試劑盒組份：

組份	20次	50次
TE (PH8.0)	6ml	6ml
溶菌酶	20mg	20mg
裂解液RLT	20ml	50ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5 ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套

注意事項(xiàng)：
1.次使用前請(qǐng)先在漂洗液RW瓶加入量乙醇，加入后請(qǐng)及時(shí)打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
3. 需要自備乙醇。
4. 裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5. 預(yù)防RNase 污染，應(yīng)注意以下幾方面：
1) 經(jīng)常更換新手套。因?yàn)槠つw經(jīng)常帶有細(xì)菌，可能導(dǎo)致RNase 污染。
2) 使用無(wú)RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3) RNA在裂解液RLT中時(shí)不會(huì)被RNase降解。但提取后繼續(xù)處理過(guò)程中應(yīng)使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小時(shí)，塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10分鐘，然后用水徹底清洗，再滅菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液應(yīng)使用無(wú)RNase 的水。（將水加入到干凈的玻璃瓶中，加入DEPC 至終濃度0.1%( v/v)，37℃放置過(guò)夜，高壓滅菌。）
6. 關(guān)于DNA 的微量殘留：
一般說(shuō)來(lái)任何總RNA 提取試劑在提取過(guò)程中無(wú)法完全避免DNA 的微量殘留,本公司的RNA 提取產(chǎn)品，由于采取了本公司獨(dú)特的緩沖體系和選擇了特殊吸附能力的吸附膜，在大多數(shù)RT-PCR 擴(kuò)增過(guò)程中其微量的DNA 殘留（一般電泳EB 染色紫外燈下觀察不可見(jiàn)）影響不是很大, 如果要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA表達(dá)量分析如熒光定量PCR,我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時(shí)：
1) 選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過(guò)mRNA中的連接區(qū),這樣DNA就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2) 選擇基因組DNA和cDNA上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對(duì)。
3) 將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔,請(qǐng)聯(lián)系我們索取具體操作說(shuō)明書(shū)。
4) 在步驟去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上進(jìn)行DNase I處理。請(qǐng)聯(lián)系我們索取具體操作說(shuō)明書(shū)。
7. RNA純度及濃度檢測(cè)：
完整性： RNA 可用普通瓊脂糖凝膠電泳(電泳條件：膠濃度1.2%；0.5×TBE 電泳緩沖液；150v，15 分鐘)檢測(cè)完整性。由于細(xì)胞中70%-80%的RNA 為rRNA，電泳后UV 下應(yīng)能看到非常明顯的rRNA 條帶。動(dòng)物rRNA 大小分別約為5 kb 和2kb，分別相當(dāng)于28S 和18S rRNA。動(dòng)物RNA 樣品中zuì大rRNA 亮度應(yīng)為次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否則表示RNA 樣品的降解。出現(xiàn)彌散片狀或條帶消失表明樣品嚴(yán)重降解。

純度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白質(zhì)污染程度的指標(biāo)。高質(zhì)量的RNA，OD260/OD280 讀數(shù)（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之間。OD260/OD280 讀數(shù)受測(cè)定所用溶液的pH 值影響。同一個(gè)RNA 樣品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中測(cè)出的OD260/OD280 讀數(shù)1.8-2.1 之間，在水溶液中所測(cè)讀數(shù)則可能在1.5-1.9
之間，但這并不表示RNA 不純。

濃度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀釋n 倍，用RNase-free 水將分光光度計(jì)調(diào)零，取稀釋液進(jìn)行OD260, OD280 測(cè)定，按照以下公式進(jìn)行RNA濃度的計(jì)算：終濃度（ng/μl）= (OD260)×(稀釋倍數(shù)n)×40

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月

本制品別名：細(xì)菌RNA提取試劑盒|細(xì)菌總RNA提取試劑盒|細(xì)菌RNA純化試劑盒|細(xì)菌RNA抽提試劑盒

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN3070	動(dòng)物RNA提取試劑(TRIzol)	100mL
BTN101121	軟骨RNA柱式提取試劑盒	50次
BTN160907	植物RNA提取試劑盒2.0(無(wú)lǜ仿柱式提取)	50次
BTN130699	RNase抑制劑(小鼠源)(40U/μL)	3000U
BTN81209	去離子水	250mL
ALH069	DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒	50次

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名稱：病毒沉淀劑
貨號(hào)：BTN110810
規(guī)格：100mL
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái)，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 能濃縮病毒100倍以上，適合各種病毒。
2. 比超速離心法、密度梯度離心分離法和過(guò)濾法更溫和，回收率更高，并且大部分病毒能保持活性，適合各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)，包括轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)和核酸純化。
3. 比超速離心法和密度梯度離心分離法簡(jiǎn)單，不需要大型離心機(jī)等設(shè)備。
4.適合水樣、細(xì)胞培養(yǎng)基上清和其他不含細(xì)胞的樣品。本產(chǎn)品100mL可以處理400mL含病毒的溶液，可以將病毒濃縮100倍以上。
5. 已經(jīng)成功用于coronaviruses 、rhabdoviruses 、parainfluenzaviruses 、respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses等病毒。
6. 對(duì)環(huán)境水樣，請(qǐng)不要使用本產(chǎn)品，而是使用水體病毒沉淀劑。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

自備試劑：PBS緩沖液或TES緩沖液(用于重懸病毒)

使用方法：
注意：需要盡量減少含病毒溶液中蛋白的濃度。收集培養(yǎng)細(xì)胞分泌的病毒前，zuì好換上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培養(yǎng)基。
1. 將培養(yǎng)細(xì)胞刮下，和培養(yǎng)基一起全部轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中，10000rpm 4℃離心20分鐘。轉(zhuǎn)移上清(含病毒)到新離心管中。如果培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)還有病毒顆粒，并且病毒顆粒可以抵抗凍融，則可以把細(xì)胞凍融數(shù)次，釋放出包漿的病毒，然后再轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中，10000rpm 4℃離心20分鐘。轉(zhuǎn)移上清(含病毒)到新離心管中。如果病毒溶液不含細(xì)胞成分，則直接進(jìn)入下一步。
2.在含病毒的上清中加入1/4 總體積的本產(chǎn)品(4mL 病毒溶液則加1mL 本產(chǎn)品)，4℃冰箱中放置過(guò)夜或12小時(shí)以上。病毒在此期間將形成沉淀。
3. 10000rpm 4℃離心20分鐘收集病毒沉淀，盡可能棄掉所有上清(可以暫時(shí)保留上清，等確認(rèn)病毒濃縮成功后再丟棄)。
4. 將離心管放回離心機(jī)短暫離心數(shù)秒，再次小心去除殘留上清。
5. 將沉淀(病毒顆粒)溶于適量預(yù)冷的自備的緩沖液(如PBS緩沖液、TES緩沖液和培養(yǎng)基中，取決于后續(xù)實(shí)驗(yàn))，立即使用或者-20℃長(zhǎng)期保存。

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