一步法Western專用封閉液的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，本制品用于科研目的，我公司的一步法Western專用封閉液品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括一步法Western專用封閉液在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：一步法Western專用封閉液
英文名稱：One Step Western Blocking Buffer
產(chǎn)品貨號：WE0296
產(chǎn)品規(guī)格：100ml

  Western Blot實驗中，為防止印跡膜與檢測系統(tǒng)中的蛋白成分(如抗體IgG等)發(fā)生非特異性吸附，導致實驗結(jié)果不清晰，通常在進行一抗孵育前需預先對印跡膜上的非特異結(jié)合位點進行封閉。本產(chǎn)品以奶粉為基礎，采用獨特配方，專用于百奧萊博一步法WB檢測中的封閉步驟，可快速地封閉膜上多余的結(jié)合部位，減少非特異結(jié)合情況的產(chǎn)生，降低背景，適用于各種轉(zhuǎn)印膜的封閉，操作方便快捷。另外，本產(chǎn)品特別添加了蛋白穩(wěn)定劑，可保證每次實驗封閉效果穩(wěn)定可靠。

注意事項：
1、每次使用時，必須保證封閉液將印跡膜完全浸沒，以免影響封閉效果。
2、本產(chǎn)品含有防腐劑，操作時請佩戴手套進行防護。
3、本產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體實驗或人體治療。

操作步驟：

1、本產(chǎn)品無需稀釋，開蓋即用。
2、目的蛋白轉(zhuǎn)移完畢后，將印跡膜放入容器中，加入適量One Step Western Blocking Buffer。
3、室溫孵育5分鐘。
4、封閉結(jié)束后棄去封閉液，進行一步法Western Blot后續(xù)操作。

儲存條件：2～8℃

根據(jù)您的關注的一步法Western專用封閉液，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
BTN131071	牛血清γ球蛋白標準品(2mg/mL)	1mL
BTN81205	一站式Tricine-SDS-PAGE套裝	30次
BTN100811	質(zhì)譜兼容型蛋白銀染試劑盒	10次
WE0316	通用型免疫組化試劑盒(鼠兔源一抗)	3ml
SY0317	SDS裂解液	100ml
SY0408	30ml重力層析空柱	1套
QN1067	磷酸化蛋白提取試劑盒	50T|100T

關注一步法Western專用封閉液，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：



名稱：谷胱甘肽瓊脂糖(GST-瓊脂糖)
貨號：BTN120101
規(guī)格：2mL
谷胱甘肽瓊脂糖親和基質(zhì)是結(jié)合谷胱甘肽(GSH)的4％濃度的交聯(lián)珠狀瓊脂糖基質(zhì)，可用于結(jié)合和分離純化帶有谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)等谷胱甘肽親和性蛋白質(zhì)分子，特別是重組表達的GST融合蛋白。可用于帶有GST標簽的重組蛋白的純化和GST pull-down實驗。

產(chǎn)品特點：
1．特異性高，不與非GST融合蛋白相結(jié)合。
2．高結(jié)合量，每毫升基質(zhì)可結(jié)合5～10mg重組GST融合蛋白。
3．高度靈活，可填裝任意品牌的柱子。

儲存條件：低溫運輸，4℃保存(切勿凍結(jié))，有效期一年。

名稱：辛甲基β葡糖苷
貨號：BTN131044
規(guī)格：1g
本產(chǎn)品是一種廣泛用于溶解膜蛋白的非離子型去垢劑。低分子量，可通過透析去除。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

名稱：BCA蛋白定量試劑盒
貨號：WE0276
規(guī)格：500次微孔板(50管次)
  BCA蛋白定量法是目前廣泛使用的蛋白定量方法之一。本產(chǎn)品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成，實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)進行快速、穩(wěn)定、靈敏的濃度測定。其原理是在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)分子中的肽鏈結(jié)構(gòu)能與Cu2+絡合生成絡合物，同時將Cu2+還原成Cu+。BCA試劑可敏感特異地與Cu+結(jié)合，形成穩(wěn)定的有顏色的復合物。在562 nm處有高的光吸收值，顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，可根據(jù)吸收值的大小來測定蛋白質(zhì)的含量。本試劑盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作為蛋白質(zhì)標準品溶液，測定范圍為20～2000μg/ml。

試劑盒組成：

組成	規(guī)格
BCA-A	2×50ml
BCA-B	3ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)	2ml

保存條件：BSA Standard Solution：2～8℃，其它組分：室溫

注意事項：
1、本產(chǎn)品可以采用分光光度計(試管檢測法)或者酶標儀(微孔檢測法)測定蛋白濃度。
2、建議每次測定蛋白樣品時，繪制標準曲線，以獲得準確數(shù)據(jù)。
3、BSA標準品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致(可用1×PBS或0.9%生理鹽水稀釋)。
4、如待測樣品中含較多的干擾物質(zhì)(具體見附表1)，可采用Bradford法蛋白定量試劑盒(WE0275)或其他蛋白定量產(chǎn)品。

使用方法：
1、稀釋BSA標準品：用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋BSA標準品。

管號	稀釋液用量(μl)	BSA標準品用量(μl)	BSA標準品zuì終濃度(μg/μl)
A	0	100	2
B	200	200	1
C	200	200(從B管中取)	0.5
D	200	200(從C管中取)	0.25
E	200	200(從D管中取)	0.125
F	200	200(從E管中取)	0.0625
G	200	0	0(空白)

2、配置BCA工作液：
1)計算BCA工作液總量：
BCA工作液總量=(BSA標準品樣本個數(shù)+未知樣本個數(shù))×復孔數(shù)×每個樣本BCA工作液體積
舉例：BSA標準品樣本個數(shù)為7個，未知樣本個數(shù)2個，復孔數(shù)3個。
試管檢測法：
BCA工作液總量=(7個BSA標準品樣本+2個未知樣本)×3個復孔×2ml/每個樣本工作液體積=54ml
微孔檢測法：
BCA工作液總量=(7個BSA標準品樣本+2個未知樣本)×3個復孔×200μl/每個樣本工作液體積=5.4ml
2)根據(jù)計算出的BCA工作液需要總量，將BCA-A和BCA-B按照50:1的體積比，配制BCA工作液，充分混勻。
注意：
a. 由于加樣可能存在誤差，建議配制BCA工作液時，多配制1-2個孔。
b. 新配制的BCA工作液室溫密封條件下可穩(wěn)定保存24小時。

3、定量檢測
①試管檢測法(蛋白濃度檢測范圍：20-2000μg/ml)
1)按上表，將稀釋好的A-G BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各100μl分別加到作好標記的試管中。推薦每個測定的樣本做2-3個平行反應。
2)向每個試管中各加入2ml BCA工作液，充分混勻，37℃水浴中孵育30分鐘 ，將各管冷卻至室溫，須在3-5分鐘內(nèi)完成檢測。
3)用分光光度計在562 nm處，測定每個樣品及BSA標準品的吸光值，同時做好記錄。
4)繪制標準曲線，計算樣品中的蛋白濃度。
② 微孔檢測法(蛋白濃度檢測范圍：20-2000μg/ml)
1)按上表，將稀釋好的A-G BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各25μl分別加到作好標記的96孔板微孔中。推薦每個測定的樣本做2-3個平行反應。
2)每孔加入200μl BCA工作液，充分混勻，蓋上96孔板蓋，37℃孵育30分鐘，冷卻至室溫，須在3-5分鐘內(nèi)完成檢測。
3)用酶標儀在540-590 nm范圍內(nèi)，測定每個樣品及BSA標準品的吸光值，同時做好記錄。
4)繪制標準曲線，計算樣品中的蛋白濃度。
注意：
a. BCA法測定蛋白濃度時，吸光值會隨著時間的延長不斷加深。因此所有樣品測定需在3-5分鐘內(nèi)完成，否則會影響蛋白定量的準確度。
b. 建議以去除背景值后的吸光值讀數(shù)繪制標準曲線。
c. 由于操作誤差導致標準品讀數(shù)嚴重偏離線性曲線的應舍去。
d. 未知樣品濃度可以從標準曲線方程中計算得出, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。
e. 如果得到的蛋白濃度不在檢測范圍內(nèi)，請重新稀釋樣品后再次測定。

4、BCA蛋白定量分析結(jié)果舉例：
微孔板檢測法結(jié)果

蛋白濃度(μg/μl)	原始吸光值	去除背景值后的吸光值
0	0.086(背景值)	0.000
0.125	0.123	0.037
0.25	0.280	0.194
0.5	0.551	0.465
1	1.068	0.982
2	2.000	1.913

附表1. 干擾物質(zhì)表

化合物	耐受濃度
緩沖液
乙酸鹽	0.2M
甘氨酸	1M
HEPES	0.1M
MES	50mM
MOPS	50mM
Na+-檸檬酸	＜1mM
PIPES	50mM
磷酸鈉	0.1M
乙酸鈉	0.2M pH 5.5
TES	50mM
Tris	0.1M
鹽類
硫酸銨	干擾
NaCl	1M
尿素	3M
性化合物
DMSO	5%
甘油	10%
去垢劑和變性劑
Brij35	1%
CHAPS	1%
鹽酸胍	4M
NP-40	1%
辛葡糖	1%
SDS	1%
Triton X-100	1%
糖類
葡萄糖	10mM
蔗糖	1M
螯合劑
EDTA	10mM
還原劑
β-巰基乙醇	50μM
DTT	1mM
其他
脂類	干擾
HCl/NaOH	0.1M

儲存條件：2～8℃

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