沙門氏菌熒光定量PCR檢測試劑盒的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的細(xì)菌PCR檢測試劑盒產(chǎn)品，本制品用于科研試驗(yàn)，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要沙門氏菌熒光定量PCR檢測試劑盒等細(xì)菌PCR檢測試劑盒產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括沙門氏菌熒光定量PCR檢測試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：沙門氏菌熒光定量PCR檢測試劑盒
英文名稱：Salmonella qPCR Kit 使
產(chǎn)品貨號：BTN11-3260
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒就是針對沙門氏菌腸毒素stn基因設(shè)計(jì)特異性引物，利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)開發(fā)的沙門氏菌檢測試劑盒，它通過熒光染料實(shí)時(shí)顯示樣品模板DNA的量，并通過坐標(biāo)曲線表示出來，結(jié)果直觀準(zhǔn)確。

沙門氏菌（Salmonella）引起的中毒病例在各地的食物中毒病例中所占數(shù)量比例非常高。在我國，70-80%細(xì)菌性食物中毒事件是由沙門氏菌引起的，沙門氏菌的檢測已成為食品質(zhì)量安全監(jiān)控的必檢衛(wèi)生指標(biāo)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 熒光定量PCR檢測，反應(yīng)特異性強(qiáng)。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品組成：

組分	編號	規(guī)格(50T)
2×qPCR Mix	BTN90408	1mL
stn專一性引物對	yw13891390	200 μL
stn陽性對照， XXX 10E9拷貝/μL	yw13911392	100 μL
超純水	BTN100935	1mL

保存條件：-20℃保存，有效期一年。

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名稱：沙門氏菌單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
貨號：SYA002
規(guī)格：48次/盒
一、簡介
沙門氏菌(Salmonella)可引發(fā)人類、家畜以及野生禽獸不同形式的疾病。感染沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染食品，可使人發(fā)生食物中毒。據(jù)統(tǒng)計(jì)在各國的種類細(xì)菌性食物中毒中，沙門氏菌引起的食物中毒常列榜。本方法為熒光PCR檢測方法，反應(yīng)在同一管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行，操作簡單，并有效防止了污染，能對樣品中或預(yù)培養(yǎng)液中的沙門氏菌進(jìn)行快速檢測，具有特異性高、敏感性強(qiáng)和操作簡便的特點(diǎn)。沙門氏菌的探針報(bào)告基團(tuán)為FAM，淬滅基團(tuán)為None。

二、用途
該試劑盒適合于增菌培養(yǎng)物、疑似病料及食品中沙門氏菌的檢測。

三、試劑盒組成(50T/Kit)
組份 數(shù)量 規(guī)格
沙門氏菌熒光qPCR反應(yīng)液(Sal-qPCR MIX) 1管 750μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
陰性對照(NTC) 1管 50μL/管
陽性對照(Sal-PTC) 1管 50μL/管

四、熒光PCR儀器適用范圍
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等熒光定量PCR檢測儀等。

五、儲存條件及有效期：
本試劑盒于-18℃以下保存，有效期為6個(gè)月。

六、樣品采集與DNA提取
6.1 樣品采集
6.1.1 食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品安家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)》(GB 4789.4-2010)要求進(jìn)行。
6.1.2 糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
6.1.3 病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
 注：上述樣品建議經(jīng)過增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測。
6.2 DNA提取(用戶可根據(jù)需要選擇商業(yè)化DNA提取試劑盒)
6.2.1 培養(yǎng)物：取培養(yǎng)物50μL(培養(yǎng)至一定濁度)或者挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
6.2.2 糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
6.2.3 其他液體標(biāo)本：取標(biāo)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
 注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。

七、檢測步驟：
7.1 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光qPCR反應(yīng)液(Sal-qPCR MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 15μL N×15μL
向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品/陰性對照(NTC)/陽性對照(Sal-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入實(shí)時(shí)熒光PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。

八、結(jié)果分析
8.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
直接讀取檢測結(jié)果?；€和閾值設(shè)定原則根據(jù)儀器噪聲情況進(jìn)行調(diào)整，以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴(kuò)增曲線的zuì高點(diǎn)為準(zhǔn)。
8.2 試驗(yàn)成立判定
（1） 陰性對照(NTC)：不應(yīng)產(chǎn)生任何的擴(kuò)增曲線。
（2） 陽性對照(Sal-PTC)：均產(chǎn)生擴(kuò)增曲線。
（3） 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則，此次試驗(yàn)視為無效。
8.3 結(jié)果判定
（1） 在試驗(yàn)成立的條件下，Ct值≤35的樣本為陽性，表明Sal核酸陽性。
（2） Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本，表明Sal核酸陰性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判為可疑樣品。對于可疑樣品，先看擴(kuò)增曲線。如果擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，則為可疑陽性，否則判為陰性。
（4） 對于可疑陽性樣品，重新抽提核酸，再次進(jìn)行Sal qPCR檢測。如果重復(fù)擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，判為樣本陽性，表明Sal核酸陽性；否則判為樣本陰性。

九、注意事項(xiàng)：
（1） 初次使用前請仔細(xì)閱讀說明書。并嚴(yán)格按照說明書步驟操作。
（2） 所有使用的離心管應(yīng)高壓滅菌，而且必須不含DNA酶。
（3） PCR操作應(yīng)嚴(yán)格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)等)，防止實(shí)驗(yàn)室污染。
（4） 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺進(jìn)行，以免污染。
（5） 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。


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