T4 RNA 連接酶 2，截短型由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研目的，我公司的T4 RNA 連接酶 2，截短型品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括T4 RNA 連接酶 2，截短型 K227Q在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：T4 RNA 連接酶 2，截短型 K227Q
產(chǎn)品貨號：SV1382
產(chǎn)品規(guī)格：10KU|2KU

特性:
將預(yù)腺苷化的 DNA 或 RNA 序列標(biāo)簽連接到任何 RNA 3′ 末端
將單鏈腺苷化引物連接至小 RNA 上，用于 cDNA 文庫構(gòu)建
將單鏈腺苷化引物連接至 RNA 上，用于鏈特異性 cDNA 文庫構(gòu)建
概述:
T4 RNA 連接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特異性將 5′ 末端預(yù)腺苷化的 DNA 或 RNA 連接到 RNA 的 3′ OH 末端。反應(yīng)無需 ATP，但需預(yù)腺苷化接頭。
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 連接酶 2，截短型（M0242）的雙點(diǎn)突變體。K227 的突變降低了賴氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 從接頭將腺苷基團(tuán)轉(zhuǎn)移到 RNA 5′ 磷酸基的活性，K227Q 可以減少 T4 Rnl2tr 非特異性的連接（串聯(lián)體和環(huán)）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中進(jìn)一步突變 R55K，提高了酶的連接活性，使其與野生型 T4 Rnl2tr 連接活性水平一致。
連接反應(yīng)的背景被降為zuì低是因?yàn)?不再使用 ATP，而改用預(yù)腺苷化接頭，同時降低賴氨酰腺苷化酶的活性。該酶已用于二代測序 small RNA 的文庫構(gòu)建中，優(yōu)化了接頭的連接過程。
來源:
重組 E. coli 菌株，攜帶有 MBP 融合表達(dá)的質(zhì)粒，該質(zhì)?？寺∮泻幋a T4 RNA 連接酶 2 的前 249 個氨基酸編碼。T4 Rnl2tr K227Q 將 227 位的賴氨酸突變?yōu)楣劝彼?。T4 Rnl2tr KQ 分別在 55 和 227 位置進(jìn)行了突變，精氨酸突變?yōu)橘嚢彼?、賴氨酸突變?yōu)楣劝滨０贰?
反應(yīng)條件:
1X T4 RNA 連接酶反應(yīng)緩沖液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 溫育。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
隨酶提供的試劑:
10X T4 RNA 連接酶反應(yīng)緩沖液
50% PEG 8000
質(zhì)保聲明:
無單鏈和雙鏈 DNA 核酸外切酶、核酸內(nèi)切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
單位定義:
200 單位指 10 μl 反應(yīng)體系中，25℃ 條件下，1 小時能將 80% 的 31-mer RNA 連接到預(yù)腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接頭（S1315）] 所需的酶量。單位活性檢測條件請聯(lián)系我們咨詢。
濃度:
200,000 units/ml。

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