真菌線粒體提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種真菌樣本中提取線粒體。提取過程簡單方便。制備的線粒體不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。...

真菌線粒體提取試劑盒(小型真菌)

 

產(chǎn)品編號(hào)：HR9103

產(chǎn)品組成：

儲(chǔ)存條件：

保存液2-8℃保存；提取液2-8℃保存或-20℃保存。有效期1年。

【注】：

● 提取液長期不用時(shí)置于-20℃保存，15天內(nèi)要多次使用的話置4℃保存即可。

● 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品簡介：

真菌線粒體提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種真菌樣本中提取線粒體。提取過程簡單方便。制備的線粒體不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。

真菌線粒體提取試劑盒最好用于新鮮樣品的線粒體提取，由于冷凍樣品的線粒體在凍存過程中可能被破壞，提取回收率可能大幅降低。

本試劑盒不適用于酵母樣品的線粒體提取，需要酵母線粒體提取可以選擇其它貨號(hào)的試劑盒。

真菌線粒體提取試劑盒(小型真菌)提取的線粒體可以用于各種線粒體功能研究、蛋白提取等下游應(yīng)用。。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 離心機(jī) ● 振蕩器 ● Dounce勻漿器/勻漿機(jī) ● 渦旋混勻器 ● PBS緩沖液(pH7.4)或HBSS

注意事項(xiàng)：

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。

● 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。

真菌線粒體提取試劑盒(小型真菌)使用方法：

1、取500mg-1g真菌樣本，用PBS洗一次。離心收集菌體沉淀。

2、在菌體中加入1-2ml提取液A后用勻漿機(jī)/Dounce勻漿器充分勻漿。

【注】：

● 或者將菌體置于研缽中用液氮研磨，研磨后加入2ml冷的提取液A。

● 或者在菌體中直接加入2ml提取液A 直接置冰上研磨。

3、將勻漿液在500×g離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。

4、將上清液在1000×g離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。

5、將上清液在2000×g離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。

6、將上清在11000×g離心20分鐘，棄上清，留沉淀。

7、在沉淀中加入400μL線粒體提取液B，充分混勻。

8、在4℃，11000×g條件下離心15分鐘。

9、棄上清，沉淀用100-200μL線粒體保存液C重懸。

【注】：

● 也可不用試劑盒中的線粒體保存液重懸。

● 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的緩沖液重懸線粒體或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。

10、即得到線粒體樣品，置冰箱備用或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。

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