YT138 Caspase 1 活性檢測(cè)試劑

Caspase 1 活性檢測(cè)試劑是高品質(zhì)的細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域,Caspase 1 活性檢測(cè)試劑是我司眾多優(yōu)質(zhì)細(xì)胞凋亡與增殖之一,質(zhì)量堪比同類(lèi)進(jìn)口產(chǎn)品,價(jià)格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷(xiāo)中,恭候您的咨詢訂購(gòu)。...
特別提示:包括Caspase 1 活性檢測(cè)試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Caspase 1 活性檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Caspase 1 Activity Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào):YT138
產(chǎn)品規(guī)格:20次|100次
本試劑盒是采用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞或組織裂解液中caspase 1酶活性或純化的caspase 1酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測(cè)或容量不超過(guò)100μl的分光光度檢測(cè)杯檢測(cè)時(shí),除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測(cè)20個(gè)樣品。
試劑盒組分:
裂解液——————8ml
檢測(cè)緩沖液——————8ml
Ac-YVAD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
Caspase是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也稱interkeukin 1b co
本caspase 1活性檢測(cè)試劑盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)檢測(cè)caspase 1的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。
試劑盒中提供了caspase 1催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,可以作為定量caspase 1酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。
注意事項(xiàng):
1. 須自備可以測(cè)定A405或A400的酶標(biāo)儀或容量不超過(guò)100μl的分光光度檢測(cè)杯及相應(yīng)分光光度計(jì)。優(yōu)先考慮測(cè)定A405,如有困難可以測(cè)定A400。
2. Ac-YVAD-pNA需盡量避免反復(fù)凍融,請(qǐng)注意適當(dāng)分裝。
3. 測(cè)定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(YT034),可向百奧萊博訂購(gòu)。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測(cè)定蛋白濃度,以降低DTT對(duì)蛋白濃度測(cè)定的干擾。
4. pNA(中文名為4-硝基苯胺)有毒,請(qǐng)注意小心防護(hù)。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
5. 本試劑盒的裂解液可以和百奧萊博的其它c(diǎn)aspase活性檢測(cè)試劑盒的裂解液通用,即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于百奧萊博其它c(diǎn)aspase活性檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件:-20℃。
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名稱:一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(綠色熒光)
貨號(hào):YT135
規(guī)格:20次|50次
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。對(duì)于經(jīng)過(guò)固定和洗滌的細(xì)胞或組織,只要經(jīng)過(guò)一步染色反應(yīng),洗滌后就可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)到呈現(xiàn)綠色熒光的凋亡細(xì)胞。本試劑盒足夠檢測(cè)20個(gè)樣品。
試劑盒組份:
TdT酶——————————40μl
熒光標(biāo)記液————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)————500μl
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè),可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時(shí),暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標(biāo)記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。注:FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫(xiě),實(shí)際上大多數(shù)情況下所謂的FITC即為fluorescein。
本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)。
(1)高靈敏度:背景染色低,陽(yáng)性染色明亮,可以在單細(xì)胞水平檢測(cè)到細(xì)胞凋亡,同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂,可以檢測(cè)到早期的細(xì)胞凋亡。
(2)特異性:TUNEL檢測(cè)時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞,而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。
(3)快速:僅需約1-2個(gè)小時(shí)即可完成。
(4)方便:只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可觀察,不必使用二抗等進(jìn)行多步操作。
(5)應(yīng)用范圍廣:可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂,但不會(huì)檢測(cè)出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開(kāi),另一方面也不會(huì)把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。
少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒(méi)有DNA斷裂,此時(shí)不適用TUNEL法檢測(cè)。在個(gè)別類(lèi)型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測(cè)呈陽(yáng)性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下,zuì好同時(shí)檢測(cè)多個(gè)凋亡指標(biāo)。
注意事項(xiàng):
1. 需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS或HBSS,用于封片的抗熒光淬滅封片液(YT097),用于固定的4%多聚甲醛或向百奧萊博訂購(gòu)免疫染色固定液(YT086),同時(shí)需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向百奧萊博訂購(gòu)免疫染色洗滌液(YT089)。
2. 如果用于石蠟切片的檢測(cè),需自備蛋白酶K,二甲苯。
儲(chǔ)存條件:-20℃。
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