Y13220 膠原蛋白

產(chǎn)品簡介
膠原蛋白的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的蛋白類產(chǎn)品,本制品用于生化實驗研究等領域,膠原蛋白是我司眾多優(yōu)質(zhì)蛋白類之一,質(zhì)量堪比同類進口產(chǎn)品,價格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示:包括膠原蛋白在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:膠原蛋白
英文名稱:Collagen
產(chǎn)品貨號:Y13220
產(chǎn)品規(guī)格:25mg|100mg
CAS:9007-34-5
儲存條件:2~8℃
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濃度:1.0mg/ml
儲存條件:2~8℃避光保存,請勿冷凍
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規(guī)格:100mg
CAS號:9045-23-2
儲存條件:2~8℃
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貨號:QN0329
規(guī)格:10mg/2ml
本品鼠尾膠原蛋白I型是通過Birkedal-Hansen的方法,通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。本公司鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環(huán)境,使細胞在三維環(huán)境中生長。
1,在使用我公司鼠膠原蛋白 I 型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長。
2,在 1mg/ml 濃度以上,pH 為 7 左右時可形成具有一定強度的三維膠,檢查到 NIH-3T3 細胞在三維膠內(nèi)正
常生長、PC-12 細胞在三維膠表面正常生長。
使用方法:
1、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度:1-5ug/cm2
以包被濃度為 2 ug/cm2為例:用無菌 0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸將膠原蛋白稀釋到 0.012mg/ml。
確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,開蓋在超凈臺上過夜晾干。 也可以在室溫放置 1小時后,用PBS洗3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3個月以上的時間。
2、三維膠原的制備
鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/mL以上,pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/mL。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06×體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。
需要的溶液(均需要無菌、預冷):10×PBS(可含10 mg/L的酚紅用于pH指示)或10×培養(yǎng)液,0.1mol/L NaOH,0.1mol/L 乙酸(一般不用),雙蒸水
A. 不含細胞的三維膠原的制備(以配制1mL,1mg/mL三維膠為例):將200μL鼠尾膠原蛋白I型(5mg/mL)加到置于冰浴的離心管中,加入 690μL H2O。然后加到12μL 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12μL 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100μL 10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。
B.含細胞的三維膠原的制備(以配制1 mL,1mg/mL三維膠為例):準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中。將200μL鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/mL)加到12μL 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12μL 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23μL 10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760μL的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項:鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫。
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