BL21pLysS感受態(tài)細(xì)胞的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的克隆與表達(dá)產(chǎn)品，本制品用于科研試驗(yàn)，我公司專(zhuān)注于克隆與表達(dá)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的BL21pLysS感受態(tài)細(xì)胞質(zhì)量可靠，批間差小，且價(jià)格公道，熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)：BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱(chēng)：BL21(DE3)pLysS Competent Cells
產(chǎn)品貨號(hào)：QN2140
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl|20×100μl

本公司生產(chǎn)的BL21（DE3）pLysS感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌BL21（DE3）pLysS菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)10⁷，-70℃保存6個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

基因型：F-,ompT,hsdSB(rB-mB-),dcm,gal(DE3),pLysS,Cmr
特點(diǎn)：該菌株帶有質(zhì)粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。質(zhì)粒pLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平，但不干擾目的蛋白的表達(dá)。該菌適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白。

儲(chǔ)存條件：-70℃保存，必須加干冰運(yùn)輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個(gè)月。

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貨號(hào)	名稱(chēng)	規(guī)格
BTN140576	pression/BTN140576.html" target="_blank">大腸桿菌DH10Bac化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞	0.1mL*10
BTN90801A	pression/BTN90801A.html" target="_blank">一站式TA克隆試劑盒	20次
BTN120687	pression/BTN120687.html" target="_blank">環(huán)孢霉素A	1mL
BTN100838	pression/BTN100838.html" target="_blank">遺傳霉素(G418)干粉	100mg
YT413	pression/YT413.html" target="_blank">溶菌酶(>20KU/mg)	0.5g
YT441	pression/YT441.html" target="_blank">pUCm-T載體	20次
YT455	pression/YT455.html" target="_blank">STAT3熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒	1μg

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名稱(chēng)：酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞制備液
貨號(hào)：BTN81201
規(guī)格：20次
本酵母電感受態(tài)細(xì)胞制備試劑是一種通過(guò)化學(xué)處理釀酒酵母和裂殖酵母電感受態(tài)細(xì)胞，使之不但馬上能用于電轉(zhuǎn)化，還能長(zhǎng)期放置后用于電轉(zhuǎn)化。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 操作簡(jiǎn)單，單溶液制備，除酵母培養(yǎng)的時(shí)間外，整個(gè)操作只需要10余分鐘。
2. 制備得到的感受態(tài)細(xì)胞可以-80℃保存一年，方便多次使用，免去每次轉(zhuǎn)化都要新鮮制備感受態(tài)細(xì)胞。
3. 主要用于釀酒酵母S.cerevisia和S.pombe，但能否用于其他酵母(如C.albicans、Pichia pastoris等)不詳。
4. zuì高轉(zhuǎn)化效率可達(dá)到0.2-1×106個(gè)轉(zhuǎn)化子/ug質(zhì)粒DNA。
5. 得到的感受態(tài)細(xì)胞可以用各種線性或環(huán)狀酵母穿梭質(zhì)粒DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
6.可以用于酵母雙雜交、定點(diǎn)突變、基因破壞、等位突變基因修復(fù)等實(shí)驗(yàn)。
7. 本試劑盒足夠處理200mL酵母菌液，制備40管酵母感受態(tài)細(xì)胞。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

自備試劑：
滅菌水，SD液體培養(yǎng)基(不含氨基酸的0.67% Bacto Yeast Nitrogen base，2%葡萄糖)，SD固體培養(yǎng)基(在SD液體培養(yǎng)基中再加2%瓊脂)，YPD液體培養(yǎng)基(1% Bacto Yeast Extract，2% Bacto Peptone，2%葡萄糖)，YPD固體培養(yǎng)基(在YPD液體培養(yǎng)基中再加2%瓊脂)

使用方法：

一：電感受態(tài)細(xì)胞的制備
 說(shuō)明：按本方法制備1 管酵母電感受態(tài)細(xì)胞就需要OD600達(dá)到1.0的新鮮酵母培養(yǎng)液5mL，用戶需根據(jù)制備的酵母感受態(tài)細(xì)胞數(shù)量決定培養(yǎng)細(xì)胞的體積。下面操作只是以10mL酵母為例說(shuō)明。
1.培養(yǎng)S.pombe細(xì)胞：挑取新鮮單菌落(4℃放置不超過(guò)3周的也可以)，接種到10mL SD液體培養(yǎng)基中。30℃搖晃培養(yǎng)，搖床速度250rpm/分鐘，直到OD600達(dá)到1.0左右(相當(dāng)于1×107細(xì)胞/mL)。
2.培養(yǎng)S.cerevisiae細(xì)胞：挑取新鮮單菌落(4℃放置不超過(guò)3周的也可以)，接種到裝在10mL YPD液體培養(yǎng)基中。30℃搖晃培養(yǎng)，搖床速度250rpm/分鐘，直到OD600達(dá)到1.0左右(相當(dāng)于1×107細(xì)胞/mL)。
3. 冰上放置15分鐘。
4.室溫1600rpm離心5 min，棄上清。
5. 用冰浴的滅菌水洗滌3次。
6. 用0.2mL冰浴的本產(chǎn)品重懸細(xì)胞。
7. 按每管0.1mL分裝到1.5-2mL的冷凍管中，直接放入-80℃冰箱待用。
 注意：不能放在液氮中，否則將喪失電轉(zhuǎn)化能力。

二：電轉(zhuǎn)化酵母感受態(tài)細(xì)胞
1. 將裝有0.1mL感受態(tài)細(xì)胞的冷凍管從冰箱取出的、放置在30℃水浴中快速化凍(快速化凍的效果好于緩慢化凍)。
2. 用1mL冰浴的本產(chǎn)品洗滌一次。
3. 加入50μL冰浴的本產(chǎn)品重懸細(xì)胞。
4. 加入1-30 ng質(zhì)粒DNA 并輕柔混勻。
5.轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的、距離為0.2cm的電擊杯中。
6. 按電擊儀的手冊(cè)設(shè)置電擊參數(shù)并進(jìn)行電擊處理，參考條件為：10kV/cm(對(duì)0.2 cm的電擊杯，則為2kV)，5ms(25F，200)(各廠家儀器的使用略有不同，請(qǐng)嚴(yán)格按電擊儀廠家提供的手冊(cè)進(jìn)行操作)。
7.電擊后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到1mL預(yù)冷的本產(chǎn)品中，輕柔混勻。
8. 取0.2mL轉(zhuǎn)化細(xì)胞涂盤(pán)(S.pombe細(xì)胞需涂盤(pán)在SD 固體培養(yǎng)基上，S.cerevisiae細(xì)胞需涂盤(pán)在YPD固體培養(yǎng)基上)，30℃培養(yǎng)4-6天。

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