可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價位合理，需要可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑等核酸擴增(PCR)產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑
英文名稱：Taq DNA Polymerase Inhibitor
產(chǎn)品貨號：BTN60901
產(chǎn)品規(guī)格：0.3mL

Taq DNA聚合酶是進行PCR的zuì常用工具酶，但是由于它在常溫下還是具有部分活性，所以經(jīng)常會出現(xiàn)非特異的擴增產(chǎn)物，尤其是當(dāng)PCR反應(yīng)體系中有大量非特異DNA存在的時候。目前zuì常見的解決方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗體和使用經(jīng)過化學(xué)修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold)，但前者的缺點是加熱后抗體會不可逆失活，后者的缺點是需要預(yù)熱處理使酶激活。

產(chǎn)品特點：
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性，即常溫抑制Taq酶活性，在45℃以上抑制功能喪失，當(dāng)溫度降低到45℃以下后，抑制活性又得以恢復(fù)。
2. 耐熱，產(chǎn)品本身為非蛋白質(zhì)試劑，遠比Anti-Taq抗體穩(wěn)定，便于保存和運輸。
3. 使用簡單，在加Taq酶前將本產(chǎn)品按PCR反應(yīng)體積的1/10直接加入即可。
4.適用范圍廣，除Taq DNA聚合酶外，還可用于抑制其他DNA聚合酶的活性，如：Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一種酶的抗體一般對另一種酶的活性沒有抑制作用。
5.與后續(xù)的RT-PCR兼容。

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前，按PCR反應(yīng)終體積1/10的比例將本產(chǎn)品加入到反應(yīng)體系中混勻，然后再加入DNA聚合酶，啟動PCR反應(yīng)。

根據(jù)您的關(guān)注的可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：


BTN90408 即用型熒光定量PCR試劑盒 1mL
BTN130923 LAMP擴增陽性對照 50次
YT401 核酸酶/DNA清除劑(噴霧清除劑) 250ml
YT402 核酸酶/RNA/DNA清除劑(噴霧清除劑) 250ml
WE0111 BaldStar Taq DNA Polymerase 500U|2500U
WE0123 熱啟動DNA聚合酶 500U|2500U
WE0127 全血Taq DNA聚合酶 2500U
WE0141 快速實時熒光定量PCR預(yù)混體系 5ml

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名稱：taq酶抗體
貨號：BTN130815
規(guī)格：500U
Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq抗體，其與Taq酶結(jié)合后抑制DNA聚合酶活性。使用本制品進行PCR擴增時，高溫變性前抗Taq抗體與Taq酶結(jié)合抑制DNA聚合酶活性，能夠在低溫條件下有效抑制引物的非特異性退火及引物二聚體引起的非特異性擴增?？筎aq抗體在PCR反應(yīng)zuì初的DNA變性步驟中變性，DNA聚合酶活性恢復(fù)，達到Hot Start PCR效果。使用本制品無需特殊的抗Taq抗體失活處理，可以在常規(guī)PCR反應(yīng)條件下使用。其工作原理如下：


儲存條件：低溫運輸，-20℃保存、有效期一年。

活性定義：Taq Antibody與Taq DNA Polymerase混合，25℃，10 min溫浴后，在55℃，10 min條件下抑制90％以上的1U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定義為1U。

純度：
1. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反應(yīng)1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
2. 10 U的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反應(yīng)1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
3. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反應(yīng)1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
4. 10 U的Taq Antibody和1μg的16S，23S rRNA在37℃或70℃下反應(yīng)1小時，RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
5. 35Cycles的PCR反應(yīng)條件下，無Mouse Genomic DNA的污染。

名稱：miRNA cDNA鏈合成試劑盒
貨號：BTN130911
規(guī)格：25次
本試劑盒采用在miRNA 3′末端加多聚A 尾的方法來使miRNA 具有Poly(A)尾，之后再使用Oligo(dT)-Tag引物進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，zuì終合成miRNA 對應(yīng)的鏈cDNA。其反應(yīng)流程如下：


產(chǎn)品特點：
1. 兩步式操作，行Poly(A)加尾，再進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
2. 只需要1μg的total RNA。
3. 所得cDNA可用于檢測多種miRNA，不僅減少了誤差、節(jié)約了樣品，同時還實現(xiàn)了檢測的高通量。
4.與miRNA熒光定量PCR 檢測試劑盒兼容。
5.特異性好，獨特的miRNA引物及反應(yīng)體系避免了Pre-miRNA的非特異擴增。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL)	10μl
10×Poly(A)聚合酶反應(yīng)液	50μl
ATP溶液，1mM	50μl
Oligo(dT)-Tag引物(0.5ug/μL)	25μl
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄(含RI)	50μl
4×RT Buffer(含dNTP)	125μl
RNase-free 水	1ml

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存。

使用方法：

一、對miRNA 3′末端進行加Poly(A)處理
1.在冰上預(yù)冷RNase-Free的反應(yīng)管內(nèi)加入以下試劑至總體積20μL。注意需要zuì后加入E.coli Poly(A)聚合酶。

試劑組份	體積
自備的Total RNA(見注)	1μg
10× Poly(A)聚合酶反應(yīng)液	2μl
ATP溶液，1mM	2μl
RNase-Free水	補水至20μL
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL)	0.4μL(2U)

注：在反應(yīng)中使用的Total RNA必須含有miRNA。也可以直接使用miRNA(建議加入量為2–5μL，需根據(jù)目的miRNA的豐度決定)。
2. 移液器輕輕混勻上述配制的反應(yīng)液，短暫離心后在37℃反應(yīng)60 min。所得的反應(yīng)液可以直接進行下游實驗(注意：只能把2μL 直接用于后續(xù)的RT反應(yīng)，多于2μL 則需要先乙醇-乙酸鈉沉淀，再將加尾后的miRNA 溶于水，然后再取所需量用于RT。如果不經(jīng)過沉淀，帶入的殘留的poly(A)聚合酶反應(yīng)液將會干擾RT反應(yīng))，也可以放置-20℃短暫保存。如需長期保存建議存放于-80℃。

二、對帶Poly(A)尾巴的miRNA進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
3. 按照下表設(shè)置20μL體系的RT反應(yīng)：

成分	體積
Poly(A)反應(yīng)產(chǎn)物(來于上步)	2μl
RNase-Free水	10μl
Oligo(dT)-Tag引物	1μl
4×RT Buffer(含dNTP)	5μl
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含RI)	2μl

4. 移液器輕輕混勻上述配制的反應(yīng)液，短暫離心后在42℃反應(yīng)60 min。
5. 70℃保溫10 min 終止反應(yīng)。
6. 合成的cDNA反應(yīng)液可放置于-20℃保存；也可以暫時冰上放置，立即用于后續(xù)的熒光PCR 定量檢測，不需要純化。

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