KFS209 細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)

細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)是高品質(zhì)的細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品用于科學(xué)研究,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)位合理,需要細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)等細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品的客戶,請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
特別提示:包括細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Cell Apotosis DNA Ladder Detection Kit
產(chǎn)品貨號(hào):KFS209
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。細(xì)胞核染色質(zhì)DNA 斷裂是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志特征。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),核酸內(nèi)切酶被激活,選擇性降解染色質(zhì)DNA,形成50-300 kb 的大片段,并進(jìn)而在核小體連接處斷裂,形成180-200 bp 或其整倍數(shù)的DNA片段,這些DNA 片段可從細(xì)胞中提取出來(lái),通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳,溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶(DNALadder),并據(jù)此判斷細(xì)胞凋亡產(chǎn)生。我司細(xì)胞凋亡DNA Ladder 檢測(cè)試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便、快速地提取染色質(zhì)DNA 的方法,并增加對(duì)小片段DNA 的回收,從而增強(qiáng)了檢測(cè)的敏感性。
注意事項(xiàng)
1. DNA Ladder 出現(xiàn)在細(xì)胞凋亡晚期,觀察細(xì)胞形態(tài)已發(fā)生皺縮出芽,染色質(zhì)完全凝聚,細(xì)胞核已固縮斷裂的凋亡晚期形態(tài),建議該種形態(tài)的凋亡細(xì)胞比例在30%以上時(shí)進(jìn)行DNA Ladder 檢測(cè)或行Tunel檢測(cè).
2. DNA Ladder 出現(xiàn)在一個(gè)較短的時(shí)間段,在凋亡早期取樣,則無(wú)DNA 降解的條帶,而在凋亡末期取樣則產(chǎn)生與細(xì)胞壞死相似的DNA 彌散條芾。因此取樣時(shí)間需根椐不同種類的細(xì)胞和誘導(dǎo)劑而摸索確定。
3. 貼壁細(xì)胞zuì好不用胰酶消化而用細(xì)胞刮收集。
4. 某些細(xì)胞不產(chǎn)生這種核小體間的DNA 斷裂,而是產(chǎn)生50-300kb 的大片段斷裂。
根據(jù)您的關(guān)注的細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱:細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)
貨號(hào):YT118
規(guī)格:100次
本試劑盒提供了一種經(jīng)典而又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),染色質(zhì)會(huì)固縮。所以Hoechst 33258染色后,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞的細(xì)胞核呈正常的藍(lán)色,而凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核會(huì)呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染,顏色有些發(fā)白。典型的Hoechst 33258染色后的細(xì)胞圖片參考下圖。

試劑盒特點(diǎn):
1. 只需25分鐘即可完成細(xì)胞凋亡檢測(cè)的整個(gè)過(guò)程。
2. 本試劑盒提供了固定液,染色液,及抗熒光淬滅封片液。
3. 本試劑盒對(duì)貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞和組織切片均適用。
4. 足夠檢測(cè)100個(gè)樣品。
試劑盒組份:
固定液————————————50ml
Hoechst 33258染色液 —————50ml
抗熒光淬滅封片液 —————— 5ml
注意事項(xiàng):
1. 需可以觀察藍(lán)色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
2. 需PBS或0.9%NaCl溶液。
3. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,染色后的樣品宜避光保存。
4. 在使用抗淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅,但仍宜盡量避光。
儲(chǔ)存條件:4℃,有效期6個(gè)月。
名稱:CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):YT157
規(guī)格:2000次
本試劑盒是基于一種熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測(cè)和細(xì)胞熒光示蹤的檢測(cè)試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測(cè)方法?;贑FDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測(cè)和[3H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測(cè)結(jié)果完全一致,但同時(shí)可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測(cè)可以提供整個(gè)細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù),同時(shí)如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。
CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47,CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時(shí),即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)個(gè)月。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會(huì)減弱一半,這樣通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)就可以檢測(cè)出沒有分裂的細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度),分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度),分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)獲得的檢測(cè)結(jié)果參考右圖。每一個(gè)峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞,從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后,分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會(huì)逐漸減少直至檢測(cè)不到。
使用CFDA SE可以檢測(cè)分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。zuì常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測(cè),甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測(cè)。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為518nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無(wú)論在體外還是體內(nèi)都不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會(huì)從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對(duì)于不同細(xì)胞,zuì佳標(biāo)記時(shí)間需自行摸索。
本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記時(shí)所需的配套試劑。如果每個(gè)檢測(cè)樣品的熒光探針標(biāo)記體積為1ml,本試劑盒共可以檢測(cè)2000個(gè)樣品。

試劑盒組份:
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶劑————————————1ml/管,共兩管
CFDA SE細(xì)胞標(biāo)記液(10X) ——————100ml/瓶,共兩瓶
注意事項(xiàng):
1. CFDA SE配制成儲(chǔ)存液后宜在一個(gè)月內(nèi)使用完畢,zuì長(zhǎng)不宜超過(guò)2個(gè)月。CFDA SE易被水解,在水溶液中會(huì)很快變質(zhì)。請(qǐng)?jiān)谑褂眠^(guò)程中避免接觸水。在標(biāo)記細(xì)胞的過(guò)程中和水接觸是在許可的范圍內(nèi)的。
2. CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期6個(gè)月。

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