北京百奧萊博供應(yīng)的臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)用于科研目的，臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)是我司眾多優(yōu)質(zhì)細(xì)胞凋亡與增殖之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)
英文名稱：0.4% Typan Blue Solution
產(chǎn)品貨號(hào)：SY0507
產(chǎn)品規(guī)格：20ml|100ml

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍(lán)色染料，可透過死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜，將其染成藍(lán)色，而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性，可將臺(tái)盼藍(lán)排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細(xì)胞（活細(xì)胞呈透明無色）和死細(xì)胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評(píng)估。臺(tái)盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺(tái)盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺(tái)盼藍(lán)（合適濃度）還常用來淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號(hào)。

本品為溶于生理鹽溶液的0.4%（w/v）臺(tái)盼藍(lán)染色液，以無菌形式提供，細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。

使用方法

1）對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，充分清洗后，用適當(dāng)緩沖液如PBS，HBSS重懸制成單細(xì)胞懸液；對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化細(xì)胞，再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。
2）取0.5ml單細(xì)胞懸液，按照1:1比例與0.5ml 0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液充分混勻，室溫染色3~10min。
【注1】：因臺(tái)盼藍(lán)具有細(xì)胞毒性，染色時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色，干擾計(jì)數(shù)。
【注2】：若細(xì)胞密度比較高，可取0.2ml單細(xì)胞懸液，經(jīng)適當(dāng)緩沖液稀釋到0.5ml，之后再用0.5ml 0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液染色。
3）取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，于顯微鏡低倍鏡下計(jì)數(shù)，分別計(jì)算著色細(xì)胞（即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和總細(xì)胞。
【注1】：用移液槍加染色細(xì)胞時(shí)，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個(gè)小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】：1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通?？刂圃?0-50 cells，當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過200個(gè)，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4）按照以下公式來計(jì)算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比，
a，計(jì)算每ml細(xì)胞數(shù)目：Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104；【注】：此時(shí)的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b，總細(xì)胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×zuì初制備單細(xì)胞懸液的總體積
c，細(xì)胞活力值：Viability（%）=（總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù)×100
【注】：通常情況，健康的對(duì)數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞，活細(xì)胞至少占到95%。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期2年

根據(jù)您的關(guān)注的臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：



名稱：MTT檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：BTN111105
規(guī)格：500次
MTT廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)，其原理是MTT可以被活細(xì)胞線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成深紫色的formazan結(jié)晶，而死細(xì)胞則無此活性。深紫色的formazan結(jié)晶被溶解后可以通過測(cè)定490nm波長(zhǎng)的光吸收而測(cè)定出其濃度，并由此推測(cè)出細(xì)胞的活力，細(xì)胞增殖越旺盛，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。其原理如下：


產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．采用獨(dú)特的Formazan溶解液，可以充分溶解formazan，減少誤差。
2．背景低，靈敏度高，線性范圍寬，重復(fù)性好。
3．本產(chǎn)品為足夠500次(5個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板)微孔板檢測(cè)。
4．可用于生物活性因子活性檢測(cè)、抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)、腫瘤放射敏感性測(cè)定等。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
說明書	1份

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸、-20℃保存(但溶液B也可以常溫運(yùn)輸和保存)，有效期一年。

使用方法：
下面操作是檢測(cè)細(xì)胞毒性的試驗(yàn)，其他應(yīng)用跟此類似或更簡(jiǎn)單(如生長(zhǎng)曲線試驗(yàn))，操作步驟可以以此為基礎(chǔ)稍作修改即可，故不再贅述。

㈠、接種細(xì)胞
1．按常規(guī)胰酶消化法消化匯合的單層細(xì)胞，收集到含血清的培養(yǎng)基中。
2．200g離心5分鐘收集細(xì)胞沉淀。
3．用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀，制備成單細(xì)胞懸浮液并計(jì)數(shù)。
4．將細(xì)胞稀釋到2.5×103個(gè)/mL～5×10個(gè)/mL之間(需要根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度決定)，如果不知道生長(zhǎng)數(shù)度，一般可以稀釋到1×10個(gè)/mL。
5．將足夠量的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中(便于用排槍取樣)。一個(gè)96孔板的MTT檢測(cè)需要約20mL的細(xì)胞懸液。
6．用排槍在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL細(xì)胞懸液(對(duì)正常細(xì)胞)。如果是腫瘤細(xì)胞，則加入100μL腫瘤細(xì)胞懸液和100μL培養(yǎng)基(總體積為200μL)。注意：一定要把細(xì)胞加在孔的正中，否則細(xì)胞會(huì)聚集在孔的角落處，影響試驗(yàn)。
7．用排槍在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟細(xì)胞懸液等體積的培養(yǎng)基。第1 列各孔將作為+培養(yǎng)基-細(xì)胞+MTT對(duì)照(用于測(cè)OD時(shí)調(diào)零)，第12列加培養(yǎng)基的作用是減少邊緣效應(yīng)對(duì)第11 列反應(yīng)的影響。
8．按常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方法在37℃和5% CO2條件下孵育1-3天，使細(xì)胞進(jìn)入指數(shù)生長(zhǎng)期。

㈡、藥物處理
9．用培養(yǎng)基將藥物稀釋到8個(gè)待測(cè)濃度(如果不知道待測(cè)濃度，則需要預(yù)試驗(yàn)確定)，一般一種藥物需要做3塊平行板。
10．去除第2到第11列(共10列)各孔中的培養(yǎng)基(不要觸動(dòng)細(xì)胞)，保留第1 列和第12列各孔中的培養(yǎng)基。
11．在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鮮培養(yǎng)基，這些孔將作為+培養(yǎng)基+細(xì)胞-藥物的對(duì)照。
12．在第3到第10列(共8列)各孔中加入8個(gè)濃度梯度的待測(cè)藥物，每列加入一個(gè)濃度的藥物。
13．按常規(guī)方法把96孔板繼續(xù)放在在37℃和5% CO2條件下孵育一定的時(shí)間，此段時(shí)間即為藥物處理細(xì)胞的時(shí)間，由用戶自己決定。
14．處理結(jié)束后去除第2 到第11列(共10列，均含細(xì)胞)所有孔中的培養(yǎng)基，并再加入100μL新鮮培養(yǎng)基。
15．每天換培養(yǎng)使細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)增2-3倍(所需時(shí)間隨細(xì)胞不同而不同)。

㈢、存活細(xì)胞計(jì)數(shù)
16．在生長(zhǎng)末期，去除第1到第11列各孔中的培養(yǎng)基后，再加入100μL新鮮培養(yǎng)基和10μL溶液A(含MTT成分)，用錫箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)4-8小時(shí)。注意：溶液A在低溫情況下會(huì)凝固，使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴至全部溶解，搖勻后使用。MTT有致癌性，一定要帶手套操作。
17．小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)基(含溶液A)。由于培養(yǎng)基可能會(huì)影響光吸收，zuì好盡可能去除。
18．每孔加入100μL溶液B，置搖床上低速振蕩10分鐘，使MTT形成的formazan結(jié)晶物充分溶解。
19．由于產(chǎn)物不穩(wěn)定，故需要立即在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上選擇490nm測(cè)定吸光度。
 注意：用第1 列各孔(+培養(yǎng)基-細(xì)胞+MTT對(duì)照)調(diào)零。
20．計(jì)數(shù)同樣處理的各次重復(fù)的平均值。
21．以藥物濃度為橫軸，以吸光度為縱軸繪制曲線。由于各處理吸光度值差別很大，一般需將其轉(zhuǎn)化成生長(zhǎng)抑制率(以不加藥物的第2和第11列各孔數(shù)據(jù)的平均數(shù)作為)，這樣便于計(jì)算出IC50，用于各種藥物處理效果的比較。注意：如果測(cè)生長(zhǎng)曲線，則以時(shí)間為橫軸。正常生長(zhǎng)曲線一般呈現(xiàn)S型，具有促進(jìn)作用的則斜率加大。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN140634	MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒	500次
YT895	Hoechst 33342染色液	10ml|50ml
SY0474	細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)	20T|50T|100T
SY0477	TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)	20T|100T
QN1309	細(xì)胞核提取試劑盒	50T|100T
QN1315	細(xì)胞凋亡Hoechst 33342/PI雙染試劑盒	100T|500T

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