2×Bes Taq Master是高品質(zhì)的核酸擴增(PCR)產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應，本產(chǎn)品用于科學研究，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多2×Bes Taq Master等核酸擴增(PCR)產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括2×Bes Taq MasterMix(含染料)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：2×Bes Taq MasterMix(含染料)
英文名稱：2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
產(chǎn)品貨號：WE0104
產(chǎn)品規(guī)格：1ml|5ml|25ml

  本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR穩(wěn)定劑和增強劑組成的預混體系，濃度為2×。Es Taq DNA Polymerase具有擴增效率高、錯配率低的優(yōu)良性能。的MasterMix配方使整個反應體系非常穩(wěn)定，超過98%的PCR擴增能一次成功，同時復雜模板也能得到有效擴增，并可zuì大限度地減少人為誤差和污染。本產(chǎn)品已加入染料(藍色)，反應結(jié)束后可直接進行電泳檢測，無需再使用上樣緩沖液。擴增得到的PCR產(chǎn)物3"端附有一個“A”堿基，因此可直接用于T/A克隆。主要適用于常規(guī)PCR反應和對高保真性有要求的基因克隆等實驗。

產(chǎn)品組成：

組份	1ml	5ml	25ml
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml	5×5ml
ddH2O	1ml	5×1ml	5×5ml

注意：2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase，3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

質(zhì)量控制：
1、經(jīng)檢驗無外源核酸酶活性；
2、PCR方法檢測無宿主殘余DNA；
3、能有效地擴增多種基因組中的單拷貝基因。

使用方法：
以下舉例為以人基因組DNA為模板，擴增1 kb的片段的PCR反應體系和反應條件，實際操作中應根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進行相應的改進和優(yōu)化。

1、PCR反應體系

試劑	50μl反應體系	終濃度
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物濃度請以終濃度0.1-1.0μM作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發(fā)生非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應體系。

2、PCR反應條件

步驟	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
預變性	94℃	2 min
變性	94℃	30 s	25-35 個循環(huán)
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
終延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度Tm低5℃，無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優(yōu)化反應條件。
2)延伸時間應根據(jù)所擴增片段大小設定，Bes Taq DNA Polymerase的擴增效率為2 kb/min。
3)可根據(jù)擴增產(chǎn)物的下游應用設定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，錯配機率會增加，非特異性背景嚴重。所以在保證產(chǎn)物得率的前提下應盡量減少循環(huán)次數(shù)。

儲存條件：-20℃，避免反復凍融。

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貨號	名稱	規(guī)格
BTN80205	DMSO，PCR級	1.5mL
BTN130833	LAMP可見光染料	1mL
YT373	YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)	200U|1000U
YT382	PCR Master Mix (含藍色電泳染料)	400次|2000次|10000次
YT398	cDNA第二鏈合成試劑盒	10次
WE0101	Taq DNA Polymerase	500U|2500U|10000U

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名稱：taq酶抗體
貨號：BTN130815
規(guī)格：500U
Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq抗體，其與Taq酶結(jié)合后抑制DNA聚合酶活性。使用本制品進行PCR擴增時，高溫變性前抗Taq抗體與Taq酶結(jié)合抑制DNA聚合酶活性，能夠在低溫條件下有效抑制引物的非特異性退火及引物二聚體引起的非特異性擴增?？筎aq抗體在PCR反應zuì初的DNA變性步驟中變性，DNA聚合酶活性恢復，達到Hot Start PCR效果。使用本制品無需特殊的抗Taq抗體失活處理，可以在常規(guī)PCR反應條件下使用。其工作原理如下：


儲存條件：低溫運輸，-20℃保存、有效期一年。

活性定義：Taq Antibody與Taq DNA Polymerase混合，25℃，10 min溫浴后，在55℃，10 min條件下抑制90％以上的1U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定義為1U。

純度：
1. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
2. 10 U的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
3. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
4. 10 U的Taq Antibody和1μg的16S，23S rRNA在37℃或70℃下反應1小時，RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
5. 35Cycles的PCR反應條件下，無Mouse Genomic DNA的污染。

名稱：通用型全基因組擴增試劑盒
貨號：BTN100941
規(guī)格：30次
本產(chǎn)品是用于基因組DNA擴增全基因組的試劑盒，可以方便、簡單、快速、經(jīng)濟的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴增樣品。

產(chǎn)品特點：
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和鏈取代能力。
2.可以擴增基因組達上萬倍，具有高產(chǎn)量和高保真性的特點。
3.可使用各種來源的樣品，包括全血，干血，發(fā)根，口腔粘膜刮液培養(yǎng)細胞，真菌和病毒等。
4. 操作簡便快捷，恒溫(30℃)反應，無須PCR儀即可實現(xiàn)擴增。
5.產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析(片段差異，微衛(wèi)星差異，SNP，STR)等。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
WGA溶液A	75μl
WGA溶液B	30μl
dNTP(10mM)	20μl
BSA	10μl
超純水	1ml
Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)	15μl
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
本產(chǎn)品適用于純化好的基因組DNA。

1.在PCR塑料管中加入1μL純化好的基因組DNA，用量在100pg-100ng之間?？梢酝瑫r做一個不加DNA模板的陰性對照。
2.在PCR管中依次加入2.5μL WGA溶液A，1μL WGA溶液B，超純水4.3μL，輕柔吹打混合均勻(現(xiàn)在PCR管中總體積為8.8μL)。
3. 95℃保溫3～5分鐘，室溫短暫離心半分鐘，然后冰上放置15分鐘。
4. 然后依次向上述反應液中加入0.5μL dNTP，0.2μL BSA，0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)，輕柔吹打混合均勻。
5. 30℃保溫3-12小時。zuì好使用PCR儀進行30℃保溫并打開熱蓋保溫。如果采用30℃水浴，zuì好在樣品管中加入30-50μL石蠟油以防水分蒸發(fā)，因為30℃長時間的水浴也能使水分蒸發(fā)到管壁，從而改變反應體系中各成分的濃度、降低WGA反應效率。如果模板DNA量比較高，WGA三小時即可檢測到DNA擴增。
6. 65℃保溫10分鐘使phi29 DNA聚合酶滅活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以zuì好將其滅活以免干擾后續(xù)反應。
7. 立即取3μL WGA反應液進行電泳檢測擴增效果。注意：WGA緩沖液中不含有甘油和電泳染料，所以需要先加上樣緩沖液。
8.擴增的DNA可以用于后續(xù)試驗或冰箱長期保存。

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