2×Babuddy Master由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要2×Babuddy Master等核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品的客戶(hù)，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括2×Babuddy MasterMix(含染料)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)：2×Babuddy MasterMix(含染料)
英文名稱(chēng)：2×Babuddy MasterMix(With Dye)
產(chǎn)品貨號(hào)：WE0110
產(chǎn)品規(guī)格：1ml|5ml

  本品是由Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase、PCRBuffer、Mg2+、dNTPs以及PCR穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑組成的預(yù)混體系，濃度為2×。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一種快速、高擴(kuò)增效率的高保真DNA聚合酶，具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。經(jīng)過(guò)改造的聚合酶其活性區(qū)域融合有一段聚合增強(qiáng)結(jié)構(gòu)域，獨(dú)特的結(jié)構(gòu)大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，是普通Pfu的6倍。其延伸速率為15-30s/kb，成功克服了普通Pfu酶擴(kuò)增效率低、擴(kuò)增速度慢的缺陷，大大縮短了反應(yīng)時(shí)間。
  本品特別適合于在基因克隆實(shí)驗(yàn)中擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA，尤其在擴(kuò)增>10 kb的DNA片段時(shí)，更加明顯，所擴(kuò)增的片段zuì長(zhǎng)可達(dá)20 kb。預(yù)配好的PCR混合液使操作更加簡(jiǎn)單快捷，可zuì大限度地減少人為誤差和污染。
  使用本產(chǎn)品擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物的3"端不帶有“A”堿基，可直接克隆于平末端載體中。如需進(jìn)行T/A克隆，需在PCR產(chǎn)物末端添加“A”后進(jìn)行克隆。本產(chǎn)品具有延伸速度快、擴(kuò)增效率高、保真性強(qiáng)的特點(diǎn)。適用于基因克隆、基因定點(diǎn)突變、SNP等實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品已加入染料(藍(lán)色)，反應(yīng)結(jié)束后可直接進(jìn)行電泳檢測(cè)，無(wú)需再使用上樣緩沖液。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、高保真性：保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，普通Pfu的6倍。
2、擴(kuò)增速度快：其延伸速率為15-30sec/kb，成功克服了普通Pfu酶擴(kuò)增效率低、擴(kuò)增速度慢的缺陷。
3、特別適合于擴(kuò)增長(zhǎng)片段：擴(kuò)增的片段長(zhǎng)度可長(zhǎng)達(dá)20kb。

產(chǎn)品組成：

組份	1ml	5ml
2×Babuddy MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×Babuddy MasterMix含有Babuddy DNA Polymerase,2×PCR Buffer, 3 mM MgCl2和400μM dNTP mix。

使用方法：
以下舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。

1、PCR反應(yīng)體系

試劑	20μl反應(yīng)體系	50μl反應(yīng)體系	終濃度
2×Babuddy MasterMix	10μl	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Reverse Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Template DNA	適量	適量	<250ng
ddH2O	up to 20μl	up to 50μl

a．模板：在50μl PCR反應(yīng)體系中，DNA模板的建議用量為低復(fù)雜度模板(如質(zhì)粒DNA，λDNA等)1 pg- 10ng，高復(fù)雜模板(如基因組DNA)50-250ng。
b．引物：引物濃度請(qǐng)以終濃度0.2-1.0μM作為設(shè)定范圍的參考，推薦終濃度為0.5μM。擴(kuò)增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí)，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應(yīng)體系。

2、PCR反應(yīng)條件
常規(guī)三步法PCR反應(yīng)：

步驟	溫度	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	98℃	30 s-3 min
變性	98℃	5-10 s	25-35 個(gè)循環(huán)
退火	45-72℃	10-30 s
延伸	72℃	2-4 kb/min
終延伸	72℃	5-10 min

a．變性：簡(jiǎn)單模板的預(yù)變性溫度為98℃，預(yù)變性時(shí)間為30 s。對(duì)于比較復(fù)雜的模板，預(yù)變性時(shí)間可延長(zhǎng)至3分鐘。
b．退火：使用本產(chǎn)品時(shí)，退火溫度設(shè)定的基本原則是，當(dāng)引物長(zhǎng)度小于或等于20 nt時(shí)，退火溫度為引物zuì低的Tm；當(dāng)引物長(zhǎng)度大于20 nt時(shí)，退火溫度應(yīng)在zuì低Tm的基礎(chǔ)上以Tm+3℃退火10-30 s。當(dāng)無(wú)法得到理想的擴(kuò)增效率時(shí)，應(yīng)以zuì低的Tm值逐步提升至模板延伸溫度。對(duì)于Tm高的引物可以使用兩步法PCR。
c．延伸：本產(chǎn)品中所包含的Babuddy DNA Polymerase的擴(kuò)增效率為2-4 kb/min，復(fù)雜性低的模板可用4 kb/min，復(fù)雜性高的基因組DNA模板，延伸時(shí)間則應(yīng)為2 kb/min，對(duì)于一些cDNA模板，延伸時(shí)間可增加到1.5 kb/min。
d．循環(huán)次數(shù)：可根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的下游應(yīng)用設(shè)定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，錯(cuò)配機(jī)率會(huì)增加，非特異性背景嚴(yán)重。所以，在保證產(chǎn)物得率的前提下，應(yīng)盡量減少循環(huán)次數(shù)。

當(dāng)引物的退火溫度較高時(shí)，建議使用兩步法進(jìn)行PCR擴(kuò)增：

步驟	溫度	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	98℃	30 s-3 min
變性	98℃	5-10 s	25-35 個(gè)循環(huán)
延伸	72℃	2-4 kb/min
終延伸	72℃	5-10 min

儲(chǔ)存條件：-20℃，避免反復(fù)凍融。

根據(jù)您的關(guān)注的2×Babuddy MasterMix(含染料)，2×Babuddy MasterMix，2×Babuddy MasterMix(含染料)，含染料，WE0110，百奧萊博，，，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

貨號(hào)	名稱(chēng)	規(guī)格
BTN90805	即用型PCR試劑盒(含染料)	1ml×10|5mL×20
BTN101219	即用型熒光定量RT-PCR試劑盒	50次
BTN130957	免RNA提取RT-PCR試劑盒(細(xì)胞組織裂解物RT-PCR試劑盒)	100次
YT376	PCR Buffer套裝(用于PCR優(yōu)化)	5ml
YT398	cDNA第二鏈合成試劑盒	10次
WE0114	2×BaHF MasterMix(含染料)	5ml

關(guān)注2×Babuddy MasterMix(含染料)，2×Babuddy MasterMix，2×Babuddy MasterMix(含染料)，含染料，WE0110，百奧萊博，，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


WE0103 Bes Taq DNA Polymerase 500U|2500U
WE0104 2×Bes Taq MasterMix(含染料) 1ml|5ml|25ml
WE0112 2×BaldStar Taq MasterMix(含染料) 5ml
WE0125 高保真多重PCR Mix(下一代測(cè)序用) 1ml|5ml
WE0137 一步法Real-Time RT-qPCR試劑盒 100次
WE0139 一步法Real-Time RT-qPCR試劑盒(高含量ROX校正染料) 100次
ALH209 KOD DNA聚合酶 250U|500U

如果您覺(jué)得“WE0110 2×Babuddy Master”描述資料不夠齊全，請(qǐng)聯(lián)系我們獲取詳細(xì)資料。(聯(lián)系時(shí)請(qǐng)告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁(yè)鏈接：http://m.mingjiewl.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8518009.html
已經(jīng)有857位訪客查看了本頁(yè).