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產(chǎn)品詳情

BTN130911 miRNA cDNA鏈合成試

  • 產(chǎn)品/服務:BTN130911 miRNA cDNA鏈合成試
  • 型 號:BTN130911
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-05-06
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):890
產(chǎn)品簡介

北京百奧萊博供應的miRNA cDNA鏈合成試用于生化實驗研究等領域,miRNA cDNA鏈合成試是我司眾多優(yōu)質核酸擴增(PCR)之一,質量堪比同類進口產(chǎn)品,價格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...

產(chǎn)品詳細介紹

特別提示:包括miRNA cDNA鏈合成試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:miRNA cDNA鏈合成試劑盒
英文名稱:miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
產(chǎn)品貨號:BTN130911
產(chǎn)品規(guī)格:25次

本試劑盒采用在miRNA 3′末端加多聚A 尾的方法來使miRNA 具有Poly(A)尾,之后再使用Oligo(dT)-Tag引物進行逆轉錄反應,zuì終合成miRNA 對應的鏈cDNA。其反應流程如下:
miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒反應流程

產(chǎn)品特點:
1. 兩步式操作,行Poly(A)加尾,再進行逆轉錄反應。
2. 只需要1μg的total RNA。
3. 所得cDNA可用于檢測多種miRNA,不僅減少了誤差、節(jié)約了樣品,同時還實現(xiàn)了檢測的高通量。
4.與miRNA熒光定量PCR 檢測試劑盒兼容。
5.特異性好,獨特的miRNA引物及反應體系避免了Pre-miRNA的非特異擴增。

試劑盒組成:
成分 規(guī)格
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL) 10μl
10×Poly(A)聚合酶反應液 50μl
ATP溶液,1mM 50μl
Oligo(dT)-Tag引物(0.5ug/μL) 25μl
MMLV 逆轉錄(含RI) 50μl
4×RT Buffer(含dNTP) 125μl
RNase-free 水 1ml


儲存條件:低溫運輸,-20℃保存。

使用方法:

一、對miRNA 3′末端進行加Poly(A)處理
1.在冰上預冷RNase-Free的反應管內(nèi)加入以下試劑至總體積20μL。注意需要zuì后加入E.coli Poly(A)聚合酶。
試劑組份 體積
自備的Total RNA(見注) 1μg
10× Poly(A)聚合酶反應液 2μl
ATP溶液,1mM 2μl
RNase-Free水 補水至20μL
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL) 0.4μL(2U)

注:在反應中使用的Total RNA必須含有miRNA。也可以直接使用miRNA(建議加入量為2–5μL,需根據(jù)目的miRNA的豐度決定)。
2. 移液器輕輕混勻上述配制的反應液,短暫離心后在37℃反應60 min。所得的反應液可以直接進行下游實驗(注意:只能把2μL 直接用于后續(xù)的RT反應,多于2μL 則需要先乙醇-乙酸鈉沉淀,再將加尾后的miRNA 溶于水,然后再取所需量用于RT。如果不經(jīng)過沉淀,帶入的殘留的poly(A)聚合酶反應液將會干擾RT反應),也可以放置-20℃短暫保存。如需長期保存建議存放于-80℃。

二、對帶Poly(A)尾巴的miRNA進行逆轉錄反應
3. 按照下表設置20μL體系的RT反應:
成分 體積
Poly(A)反應產(chǎn)物(來于上步) 2μl
RNase-Free水 10μl
Oligo(dT)-Tag引物 1μl
4×RT Buffer(含dNTP) 5μl
MMLV 逆轉錄酶(含RI) 2μl

4. 移液器輕輕混勻上述配制的反應液,短暫離心后在42℃反應60 min。
5. 70℃保溫10 min 終止反應。
6. 合成的cDNA反應液可放置于-20℃保存;也可以暫時冰上放置,立即用于后續(xù)的熒光PCR 定量檢測,不需要純化。

根據(jù)您的關注的miRNA cDNA鏈合成試劑盒,miRNA cDNA鏈合成試劑盒,BTN130911,百奧萊博,,,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:

貨號 名稱 規(guī)格
BTN131176 石蠟包埋組織直接RT-PCR試劑盒(免RNA提取) 30次
BTN130840 硫酸鎂溶液(PCR級MgSO4溶液) 5mL
BTN100409 6nt隨機引物(0.5 ug/uL) 5μg
BTN131042 miRNA熒光定量RT-PCR檢測試劑盒 25次
BTN80206 兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq) 50次
BTN101114 通用型RT-LAMP恒溫擴增試劑盒 50次


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名稱:富含GC PCR Buffer
貨號:YT377
規(guī)格:2ml
本品提供了4種不同的GC-rich PCR Buffer,為擴增高GC含量的DNA片段提供了多種不同的選擇,大大提高了高GC含量DNA片段的擴增成功率。

本套裝提供的Buffer可以單獨使用,也可以組合使用。這樣可以在更多條件下優(yōu)化PCR條件。

提供了推薦的幾種經(jīng)過優(yōu)化的GC-rich PCR Buffer的組合方式,便于用戶直接選用。

根據(jù)相關文獻報道,單一的GC-rich PCR Buffer對于某一個高GC含量的DNA片段的擴增效果很好,但對于另外一個高GC含量的DNA片段則很可能會擴增效果不太理想。正因為很難采用一種通用的GC-rich PCR Buffer 完成對于不同的高GC含量DNA片段的擴增,因此對于高GC含量DNA片段的擴增一直是分子生物學操作過程中的一個難點。針對這一實際情況,我司推出了可以給予用戶多種條件進行優(yōu)化組合的4管套裝GC-rich PCR Buffer。

本GC-rich PCR Buffer可以適用于各種常見的耐熱DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA polymerase等。

產(chǎn)品組份:
5×GC-rich PCR Buffer A————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer B————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer C————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer D————0.5ml

注意事項:
1)在使用本試劑盒提供的GC-rich PCR Buffer的同時,必須同時使用和DNA聚合酶配套的zuì終濃度為1×的含鎂離子PCR Buffer。
2)由于PCR反應非常靈敏可以擴增目的基因序列超過1000萬倍,在操作時請注意避免微量待擴增DNA的污染,并盡量考慮設置不加模板的空白對照以確認是否有待擴增DNA的污染。

儲存條件:-20℃。

名稱:核酸酶/DNA清除劑(噴霧清除劑)
貨號:YT401
規(guī)格:250ml
本品是一種清除實驗儀器、設備、材料固相表面的RNase和DNase等核酸酶污染的噴灑型試劑,主要用于創(chuàng)造潔凈的DNA和RNA操作環(huán)境;同時,本產(chǎn)品還能清除DNA,有助于消除環(huán)境中污染的DNA對于qPCR的干擾。

本產(chǎn)品能有效清除RNase、DNase和DNA,并且不會直接影響RNA的穩(wěn)定性,具體的使用效果甚至優(yōu)于進口品牌。

本產(chǎn)品使用安全,性,但略有腐蝕性,在某些用途方面是一種非常安全的DEPC替代品。

本產(chǎn)品使用便捷。使用時直接將本產(chǎn)品均勻噴灑于固體表面,約5分鐘后用潔凈紙巾擦拭干凈即可進行后續(xù)的實驗操作。

本產(chǎn)品適用于實驗儀器設備如PCR儀、離心機、移液器、實驗臺、試管架、離心管架、電泳槽等,及實驗耗材如離心管、槍頭、手套等表面核酸酶污染的清除,對于塑料制品、乳膠制品、玻璃制品、不銹鋼制品均有效。

本產(chǎn)品對RNA無影響,微量的本產(chǎn)品殘留也不會明顯影響下游的RNA相關實驗。

注意事項:
1) 本產(chǎn)品每次使用后應當擰緊噴頭,保證本產(chǎn)品的密閉保存,避免長時間接觸空氣,以免影響使用效果。
2) 使用本產(chǎn)品清除實驗器材等表面的核酸酶污染后,仍需注意戴手套、口罩等進行操作,以免工作環(huán)境和樣品被污染。
3) 本產(chǎn)品用于儀器設備時,僅限于儀器設備表面可以擦拭清洗的地方,嚴禁本產(chǎn)品流入儀器設備內(nèi)部,以免影響或破壞儀器設備的正常運行。

儲存條件:室溫密封,有效期一年。

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公司名稱:北京百奧萊博科技有限公司

聯(lián)系人:王欣

電話:18518407031

手機:18518407031(微信同步)

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