無縫連接克隆試劑盒由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學研究方面，我公司的無縫連接克隆試劑盒品質上佳，經過多年的開發(fā)生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括無縫連接克隆試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱：無縫連接克隆試劑盒
英文名稱：Seamless Assembly and Cloning kit
產品貨號：ALH338
產品規(guī)格：10次

本試劑盒不依賴于T4連接酶，不受載體和目的片段的酶切位點限制，而直接用同源重組的方法，采用特殊的重組酶可以將任意方法線性化后的載體和與其兩端具有 15-25bp 重疊區(qū)域的PCR片段定向重組，可以快速實現(xiàn) 1-5 個片段的無縫克隆。

試劑盒特點：
1.30分鐘可以將一個或者多個長、短PCR擴增片段（平端、A端均可）插入載體。
2.不受載體和插入片段酶切位點的可用性和平端/粘性末端的限制，可以在任意位點進行克隆。
3.無縫克隆，插入點不會引入不需要的堿基序列。
4.、準確，陽性率＞95% 。

儲存條件：-20℃。

本制品別名：通用型連接克隆試劑盒

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名稱：大腸桿菌DH10B化學感受態(tài)細胞
貨號：BTN140374
規(guī)格：0.1mL*10
本產品是采用大腸桿菌DH10B菌株經特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學轉化。

產品特點：
1. 使用 pUC19質粒檢測，轉化效率可達10，-80℃保存幾個月轉化效率不發(fā)生改變。
2.可用于轉化150Kb大小的質粒，可用于藍、白斑篩選。
3. DH10B菌株基因型：F- mcrA Δ(mrr -hsdRMS-mcrBC)Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG
4. 本產品質量穩(wěn)定，使用方便，質優(yōu)價廉。

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等

使用方法：
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μl，可以根據(jù)實際情況分裝使用。
以下實驗以100μL感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細胞能夠被1ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含有相應抗生素的LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。

注意事項：
1、涂布用量可根據(jù)具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數(shù)較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

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貨號	名稱	規(guī)格
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BTN140382	pression/BTN140382.html" target="_blank">農桿菌AGL1化學感受態(tài)細胞	10×100μL
JN0105	pression/JN0105.html" target="_blank">2×pED-T vector快速連接預混液	20次
JN0110	pression/JN0110.html" target="_blank">pBalbAvi質粒	20次(1μg)
JN0125	pression/JN0125.html" target="_blank">BL21(DE3)感受態(tài)細胞(pG-KJE8分子伴侶)	100μl×10
QN1062	pression/QN1062.html" target="_blank">pEGFP-N1 哺乳動物表達載體	20μl

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